Dynamique et mécanismes de rétention sélective des protéines dans le réticulum endoplasmique – ExportER

Le réticulum endoplasmique (RE) est le point d'entrée de la voie sécrétoire, où les protéines nouvellement synthétisées sont repliées, modifiées et emballées dans des intermédiaires de transport pour être exportées vers d'autres compartiments. La manière dont le RE fait la distinction entre les protéines résidentes et les protéines sécrétoires n'est toujours pas claire. Les protéines portant un signal de rétention, comme le motif KDEL carboxy-terminal, sont exportées du RE moins fréquemment que prévu dans l’hypothèse d’un simple mécanisme de recyclage, ce qui suggère un rôle de rétention supplémentaire, et la machinerie COPII a été impliquée dans ce processus. Cependant, aucun modèle intégratif n'a été proposé jusqu'à présent. Ce projet vise à comprendre comment les protéines résidentes du RE sont sélectivement retenues et triées et porte sur le rôle du signal KDEL et des principales protéines du RE dans ce processus.
Nous nous concentrons sur les sites de sortie du RE (ERES) en tant que centre de tri clé. Dans l’axe 1, nous suivrons le mouvement et la dynamique des protéines en utilisant des approches de photoblanchiment (FRAP) et le suivi de particules uniques (SPT). L’éventuel comportement diffusif des protéines résidente du RE lors de phase aigües de sécrétion induite par le système « RUSH » sera quantifié.
L'axe 2 étudiera, par des approches d’inactivation réversibles, les protéines de rétention candidates telles que TANGO1, p24, Surf4 et le récepteur KDEL, en évaluant leur rôle dans de filtre au niveau de l'ERES.
Dans l'objectif 3, nous construirons un « proximome » complet en utilisant le marquage de proximité TurboID des ERES durant les phases de sécrétion. Cela révélera comment le RE adapte ses mécanismes de rétention à la charge sécrétoire.
Ce travail fournira des informations fondamentales en biologie cellulaire sur les mécanismes de rétention du RE, avec des implications thérapeutiques potentielles dans certains cancers et maladies du développement.