Décryptage de la relation entre la fonction moléculaire de l'hélicase DDX17 et la formation d'organelles sans membrane – HELICOR

Les ATPases à boîte DEAD (DDX) constituent une grande famille de protéines dont les fonctions dans le métabolisme des ARN peuvent à première vue sembler parfois similaires. Cependant, l'évolution a probablement maintenu cette diversité de protéines apparentées pour accomplir des tâches spécifiques difficiles à cerner dans les cellules. Nous avons récemment identifié des variants de novo du gène DDX17 chez des individus souffrant d'un trouble neuro-développemental, soulignant le besoin urgent de mieux caractériser les fonctions précises de cette protéine, qui est impliquée dans la maturation co-transcriptionnelle des ARN pré-messagers. Le panel de substitutions d'acides aminés associées à la maladie que nous avons identifiées, principalement localisées dans les domaines de liaison à l'ATP ou à l'ARN, fournit des outils précieux pour étudier les activités moléculaires et cellulaires de DDX17. Nous proposons d'étudier comment DDX17 contrôle les structures d'acides nucléiques dans les cellules humaines et de caractériser complètement ses gènes et transcrits cibles. Nous étudierons l'impact des variants de DDX17 sur les fonctions de DDX17 par des approches in silico et biochimiques, et générerons des modèles cellulaires porteurs de variants endogènes de DDX17 pour relier ces fonctions moléculaires altérées aux défauts du transcriptome. Enfin, nous utiliserons des techniques de microscopie de pointe pour analyser dans ces modèles cellulaires comment les mutations de DDX17 affectent la condensation de DDX17 elle-même, mais aussi d'autres organites sans membrane liés à la maturation des ARN, comme les speckles nucléaires. Grâce à la complémentarité de notre consortium, notre projet permettra d'atteindre un niveau de connaissance sans précédent sur les fonctions moléculaires et cellulaires de DDX17, et facilitera l'interprétation des caractéristiques cliniques des patients liés à DDX17. Il nous aidera aussi à comprendre ce qui rend DDX17 unique parmi les autres hélicases.