Régulation par CD63 de la dégradation lysosomale de l'ADN extranucléaire au cours du vieillisement – CLEAR_DNAge

Au cours du vieillissement, l'accumulation de cellules sénescentes entraîne une détérioration progressive de l'homéostasie des tissus. Les dommages à l'ADN sont considérés comme un facteur central dans la génération de cellules sénescentes. Cependant, les mécanismes qui maintiennent la stabilité du génome dans la jeunesse, et leur dérégulation au cours du vieillissement ne sont pas connus. In vitro, les cellules sénescentes perdent l'intégrité de leur enveloppe nucléaire et peuvent éliminer l'ADN endommagé extranucléaire dans leurs lysosomes, mais la pertinence de cette voie de clairance pour le vieillissement et sa régulation in vivo ne sont pas connues.
Nos résultats révèlent qu’au cours du vieillissement, les macrophages génèrent des lysosomes CD63+ nécessaires à l’élimination de l'ADN extranucléaire suite à la rupture de leur enveloppe nucléaire. Nous associons ces effets à de nouvelles fonctions de CD63 dans le trafic lysosomal de DNAse et la maturation des autophagolysosomes.
L'objectif principal de "CLEAR-DNAge" est d’étudier ce nouvel axe dépendant de CD63 de la clairance par les lysosomes de l'ADN extranucléaire et sa (dé)-régulation dans la sénescence.
Nous combinerons des approches d'imagerie et de biochimie dans des souches de souris, des cellules primaires qui en sont dérivées et des lignées cellulaires pour 1) étudier les mécanismes et les voies de signalisation régulant l'induction de cette voie de clairance lors de l'accumulation de dommages à l'ADN, 2) comprendre le rôle de CD63 pendant la génération des nucléophagolysosomes et la dégradation lysosomale de l'ADN à l'échelle subcellulaire 3) analyser les conséquences de sa dérégulation dans la sénescence in vivo notamment via la transmission paracrine de la sénescence via la sécrétion d’exosomes associés à l'ADN.
Ce projet établira la régulation, l'activité d'une nouvelle voie de clairance des dommages à l'ADN et les conséquences de sa dérégulation au cours du vieillissement.