Développement préclinique de thérapies par modulation de l'expression de la Dynamine 2 – DynANR

Les myopathies centronucléaires (CNM) sont des myopathies congénitales rares caractérisées par une position centrale anormale des noyaux dans les fibres musculaires en l'absence de régénération musculaire. Les trois principales formes comprennent la CNM récessive liée au chromosome X due à des mutations de la myotubularine (MTM1), et les formes autosomiques dues à des mutations dominantes de la dynamine 2 et à des mutations récessives de l'amphiphysine 2 (BIN1) et du récepteur de la ryanodine 1. La Dynamine 2 (DNM2) est un acteur clé du trafic membranaire et un régulateur des cytosquelettes d'actine et de microtubules. Nos deux équipes ont développé des thérapies potentielles pour les CNMs basées sur la réduction de l'expression de la DNM2. La première thérapie est basée sur l’invalidation allèle-spécifique des ARNm DNM2 mutés ou non mutés par interférence ARN. Nous avons développé des siRNA contre la mutation la plus fréquente de la DNM2 causant la CNM dominante et des siRNA polyvalents capables d’invalider toutes les mutations de la DNM2. Leur bénéfice thérapeutique a été validé dans un modèle murin et dans des cellules dérivées de patients. La seconde thérapie, visant la réduction de l'expression globale de DNM2 (invalidation pan-allèlique), notamment à l'aide d'oligonucléotides antisens, a été utilisé avec succès dans des modèles murins des formes génétiques de CNM liées à MTM1, BIN1 et DNM2. Sur la base de ces premières preuves de concept, DynANR vise à poursuivre le développement préclinique de ces deux thérapies pour les CNMs et à étendre leur champ d'application à travers 4 axes :

1. Développement de la thérapie allèle-spécifique. Nous optimiserons le virus adéno-associé comme vecteur de cette thérapie dans un modèle murin de la forme classique de l’adulte de CNM dominante et évaluerons l'efficacité thérapeutique de l’invalidation allèle-spécifique dans des cellules musculaires de patients et dans un second modèle murin mimant la forme la plus sévère liée à des mutations du DNM2. Les bénéfices des siRNA polyvalents seront également évalués dans les CNM liées à MTM1 et BIN1.

2. Développement de la thérapie pan-allélique. Nous évaluerons le bénéfice thérapeutique de la réduction globale du DNM2 dans une autre forme génétique de CNM. Nous développerons également une nouvelle génération d'oligonucléotides utilisant une autre chimie et un autre mode d'action.

3. Édition de gènes. Nous évaluerons l'efficacité de l'édition de gènes par CRISPR/Cas9 en tant que nouvelle technologie pour réduire l'expression de la DNM2 dans des approches alléle-spécifiques et pan-alléliques. Les bénéfices thérapeutiques seront évalués dans des modèles murins de CNM liés à MTM1 et DNM2.

4. Biomarqueurs et nouvelles applications. Nous déterminerons des biomarqueurs pour suivre la progression de la maladie et l'efficacité de thérapies à partir de l’analyse transcriptomique de muscles de patients atteints de CNM. Nous déterminerons également le niveau de DNM2 dans un panel de maladies neuromusculaires afin de mettre en évidence de nouvelles indications pour la réduction de DNM2.

Par une interaction renforcée entre nos deux équipes, l'ambition de DynANR est d'accélérer le développement préclinique des thérapies DNM2 nécessaires aux essais cliniques ciblant plusieurs formes de CNM. Les quatre axes sont basés sur des données préliminaires et sur l'expertise, les concepts et les méthodologies déjà développés par les deux partenaires, en particulier grâce aux soutiens antérieurs de l'ANR.