Etude des differences de signalisation des TLR7 et TLR9 dans les lymphocytes B et leur impact sur le lupus. – TOLLSig

Dans le lupus, les Toll-like Recepteurs (TLR) endosomaux, TLR7 et TLR9, induisent une perte de tolerance vis-a-vis des acides nucleiques, l’ARN et l’ADN respectivement. Considérés auparavant comme homologues, TLR7 et TLR9 ont un effet opposé sur la sévérité du lupus.TLR7 aggrave la maladie alors que TLR9 est protecteur, et ce lorsqu’il est spécifiquement exprimé dans les lymphocytes B (LB). Déterminer comment ces deux TLR induisent des effets contraires sur le lupus est l’objet de ce projet.
Notre hypothèse est que TLR7 et TLR9 induisent, dans les LB, des voies de signalisation différentes. Pour la tester, j’ai créé un TLR9 chimérique, appelé TLR997,dans lequel le domaine de signalisation-TIR endogène a été remplacé par le TIR de TLR7. Pour déterminer si la nature du TIR influence la sévérité du lupus, nous avons introduit le TLR997 par CRISPR/Cas9 dans le locus endogène de TLR9 de souris lupiques. Les souris TLR997 homozygotes-TLR7-/- développent un lupus plus sévère que les souris natives pour le TLR9 (TLR999) -TLR7-/-. Ces résultats préliminaires prouvent que les TIRs de TLR7 et TLR9 ont des différences fonctionnelles, que ce projet cherchera à caractériser grâce à ce modèle inédit. Nous déterminerons les consequences fonctionnelles des TIR sur la differentiation des LB in vitro et in vivo, dans un modèle de chimère de moelle osseuse. A l’aide d’approches biochimiques, nous caractériserons les différences de voies de signalisation entre les deux TIR qui pourraient être dues à des différences de la voie MyD88 et/ou à l’intervention de nouveaux partenaires qui seraient pro-inflammatoires (pour TLR7) ou régulateurs (pour TLR9). Nous testerons plus precisement le rôle de deux candidats régulateurs : Lyn et CD22. La difference de fonction des TIR de TLR7 et TLR9 est un résultat innatendu et innovant. Ce projet ouvre des perspectives de nouvelles cibles thérapeutiques dans le lupus mais aura au-delà des implications fondamentales dans le domaine de l’immunité innée.