Caractérisation d’un nouveau site de liaison à l’ADN dans la protéine BRCA2 – FUNBRCA2

La protéine suppresseur de tumeur BRCA2 est essentielle à la réparation des dommages de l'ADN par recombinaison homologue (RH). Elle facilite le recrutement de la recombinase RAD51 au sites de cassure double-brin. Cette fonction est exécutée par le domaine C-terminal de liaison à l'ADN (CTD), qui lie l’ADN simple-brin, et les répétitions BRC, qui recrutent RAD51 et contribuent à son chargement sur l’ADN. Cependant, notre découverte récente d'un nouveau domaine de liaison à l'ADN dans la région N-terminale de BRCA2 qui stimule l'activité RH de RAD51 in vitro pose de nouvelles questions sur les mécanismes de réparation par BRCA2: comment les deux domaines de liaison à l'ADN de BRCA2 se coordonnent-ils pour déclencher l'activité RH de RAD51 ? est-ce que la perte de l'une de ces interactions conduit à une fonction RH défectueuse dans la cellule ?
Des travaux récents suggèrent que les régions C-terminale et N-terminale de BRCA2 interagissent en trans, ce qui expliquerait que les deux domaines puissent coopérer lors de la liaison de BRCA2 à l'ADN. Ce processus pourrait réguler l'activation de BRCA2 aux cassures double-brin. Chez l'orthologue de BRCA2 dans U. maydis, cette régulation semble dépendre de DSS1, une protéine qui interagit avec le domaine de liaison à l'ADN C-terminal, empêchant sa liaison à l'ADN. Cependant, la forme oligomérique de BRCA2 humaine active aux cassures n'est pas connue. Le rôle de DSS1 dans la régulation de l'oligomérisation et la liaison à l'ADN de BRCA2 humaine n'est également pas décrit.
Dans ce projet, nous proposons une approche intégrative qui repose sur l'utilisation de la bioinformatique structurale, la biochimie, la biologie structurale et différents outils de biologie cellulaire, en combinaison avec l'information phénotypique provenant des variants naturels de BRCA2, pour révéler de nouveaux domaines fonctionnels dans la région N-terminale de BRCA2 a priori non structurée, avec un focus particulier sur le domaine de liaison à l'ADN identifié récemment.