Ontogenèse de la mégacaryopoïèse humaine – Megon

Ce projet a pour but de comprendre les changements ontogéniques qui surviennent sur la lignée mégacaryocytaire. Ce projet est motivé par l?observation que certains mécanismes oncogéniques responsables de leucémies à mégacaryoblastes de l?enfant surviennent uniquement sur des progéniteurs mégacaryocytaires f?taux et qu?inversement la thrombopénie néonatale du syndrome de TAR régresse en partie chez l?enfant, suggérant de profonds changements dans la régulation de la mégacaryopoïèse. Une partie du projet est également focalisée sur l?hématopoïèse primitive dont le composant mégacaryocytaire est très mal connu, en particulier chez l?homme, partie qui est actuellement rendue possible grâce à la différenciation hématopoïétique des cellules ES. Globalement ce projet a trois intérêts majeurs: 1) une meilleure compréhension de l?ontogénie du système hematopoïétique qui est un système de référence pour les autres modèles de différenciation; 2) comprendre si la différenciation hématopoïétique des cellules ES reflète réellement l?ontogénie, ce qui a des conséquences importantes dans leur utilisation dans l?avenir comme modèle de différenciation à la fois pour des études à visées fondamentales ou thérapeutiques et 3) de caractériser le rôle de la voie Notch sur la mégacaryopoïèse au cours de l?ontogénie et plus particulièrement sur l?induction de la différenciation mégacaryocytaire aux dépens de l?érythropoïèse à partir du progéniteur bipotent érythro/mégacaryocytaire (MEP). Le premier objectif du projet est de caractériser les changements phénotypiques qui surviennent sur le mégacaryocyte lui même de l?hématopoïèse primitive à l?hématopoïèse adulte. Pour avoir accès à ces temps précoces de l?ontogénie nous utiliserons le modèle de la différenciation hématopoïétique des cellules ES humaines et le comparerons à celui de sac vitellin et du foie f?tal. A partir de ces mégacaryocytes, des profils transcriptionnels seront réalisés pour caractériser des changements dans l?expression de gènes impliqués dans les fonctions plaquettaires et pour identifier des facteurs de transcriptions spécifiques de chaque stage ontogénique et ensuite d?évaluer leurs fonctions. Le second objectif est d?étudier l?émergence de la mégacaryopoïèse au cours de l?ontogénie en réalisant une cartographie fonctionnelle et moléculaire des progéniteurs. Le projet sera essentiellement centré sur le progéniteur bipotent érythro-mégacaryocytaire (MEP) et sur sa présence au cours des différentes étapes de l?ontogénie. Nous étudierons plus particulièrement si le MEP émerge directement d?un précurseur mésodermique (hémangioblaste) ou d?un progéniteur commun avec les macrophages au cours de l?hématopoïèse primitive. Nous étudierons le rôle de plusieurs facteurs de transcription (FLI-1, AML-1, EKLF et MYB) dans le processus d?émergence du MEP et de détermination vers les lignées érythroides et mégacaryocytaire et déterminerons l?existence éventuelle d?autres facteurs de transcription impliqués dans ce processus. Le troisième objectif consistera à étudier le rôle de la voie Notch au cours de l?ontogénie de la mégacaryopoïèse avec trois questions : - est ce que les différents ligands de Notch ont les mêmes effets au cours de l?ontogenèse ? ; - Est ce que la signalisation par Notch induit la détermination du MEP vers la lignée mégacaryocytaire ? et enfin sur quels facteurs de transcription interagit cette signalisation ? Nous pensons que ce projet permettra de comprendre les changements ontogéniques survenant sur la mégacaryopoïèse et ainsi à terme permettra d?aborder l?étude précise des mécanisme moléculaire de plusieurs pathologies humaines.