Rôle de la protéine Gbs2018C dans l'hypervirulence du clone ST-17 du Streptocoque du groupe B – HYPERVIRGBS

Le streptocoque du groupe B (SGB) est la cause majeure d'infections invasives chez le nouveau-né. C'est également une bactérie commensale des flores intestinale et vaginale chez l'adulte. Les nouveaux-nés sont infectés à la naissance par voie respiratoire ou digestive. Des études épidémiologiques ont montré qu'un clone de sérotype III, dénommé ST-17, est responsable de la majorité des infections invasives néonatales et de la quasi-totalité des cas de méningites. La capacité de ce clone hypervirulent à adhérer et/ou envahir spécifiquement les cellules épithéliales et endothéliales qui constituent les barrières de l'hôte n'a été que peu étudiée, de même que sa faculté à coloniser l'intestin et engendrer une infection invasive. Nous allons donc développer des modèles cellulaires et animaux permettant de caractériser la virulence propre au clone ST-17 et étudier plus particulièrement le rôle de la protéine de surface Gbs2018C qui lui est spécifique dans le développement de l'infection.Le streptocoque du groupe B (SGB) est la première cause d'infections invasives chez le nouveau-né bien qu'il soit une bactérie commensale de la flore intestinale et vaginale d'adultes sains. Des études d'épidémiologie moléculaire ont montré qu'un clone de sérotype III dénommé ST-17 était responsable de la majorité des infections néonatales et de la quasi-totalité des cas de méningites. Curieusement, peu de données sont disponibles sur les capacités d'adhésion, d'invasion d'épithelia ou d'endothélia et sur les facteurs de virulence associés à ce clone. Sur la base de nos résultats préliminaires qui suggèrent que la protéine de surface Gbs2018C spécifique du clone ST-17 régule les propriétés d'adhésion du clone à différents types cellulaires, nous proposons d'approfondir notre étude en :
1) recherchant si l'expression de Gbs2018C rend compte :
a) d'une augmentation de l'adhésion bactérienne à des cellules épithéliales ou endothéliales, à des cultures primaires et tissulaires (epithelium pulmonaire et intestinal and endothelium cérébral (BBB)
b) des capacités d'invasion de ces mêmes cellules et tissus, explorant ainsi les modalités de et de franchissement des barrières correspondantes.
Dans ce but des mutants de délétion dans deux fonds génétiques (NEM316/ST-23 et BM110/ST17) pour Gbs2018C et des mutants ponctuels seront construits.
2) caractérisant les domaines de Gbs2018C potentiellement impliqués dans l'adhésion et l'invasion cellulaire, ce grâce à une combinaison d'approches menées in vitro en utilisant le panel des mutants disponibles.
3) en analysant les cinétiques de colonisation des muqueuses (pulmonaire, EOD ; intestinale, LOD) par le clone ST-17 et les mutants de Gbs2018C et leur dissémination. Cette étude reposera sur les modèles de souris adultes et de rats nouveau nés infectés par différentes voies.

Ce travail aboutira à évaluer (i) si le clone hypervirulent ST-17 de GBS possède des propriétés d'adhésion accrues aux cellules épithéliales et endothéliales, qui constituent les barrières de l'hôte que GBS doit traverser in vivo, (ii) si la protéine de surface Gbs2018C, spécifique du clone ST-17, est directement impliquée dans le phénotype d'hypervirulence, en précisant si, en totalité ou par l'intermédiaire de sous-domaines, elle suffit à conférer des propriétés d'hyperadhésion aux cellules, et enfin (iii) si l'hyperadhésion est également couplée à une augmentation de la capacité de GBS à coloniser l'hôte, à adhérer aux barrières muqueuses et hémato-encéphalique et à les franchir. Nous espérons également identifier le récepteur cellulaire de Gbs2018C et à moyen terme, par une meilleure connaissance des bases moléculaires de l'hypervirulence de ST-17, jeter les bases du développement de molécules ou de vaccins permettant d'inhiber l'interaction ST-17-cellule hôte.