Caractérisation des kinases humaines impliquées dans la phosphorylation H2AX en réponse aux irradiations – EPIGENOTOX

La phosphorylation de l’histone H2AX (gamma-H2AX) aux abords des cassures doubles brins (DSB) a récemment été caractérisée comme une des réponses les plus précoces aux rayonnements ionisants. En outre, la détection des foyers gamma-H2AX est aujourd’hui la méthode la plus sensible pour détecter ces DSB. La détection et la quantification des foyers gamma-H2AX pourraient ainsi constituer un biomarqueur de choix pour estimer la dose de rayonnements reçue par un individu, y compris en radiothérapie. Au cours de ce projet nous souhaitons utiliser la technologie des puces à siRNA (small interfering RNA) que nous développons au laboratoire pour : 1 - Identifier, par interférence ARN à haut débit, les kinases impliquées dans la phosphorylation de l’histone H2AX et/ou la formation de foyers gamma-H2AX en fonction de la dose reçue, sur des cellules primaires d'épiderme humain. 2- Comparer les réseaux de kinases impliqués dans la formation des foyers gamma-H2AX dans les cellules tumorales (HaCaT) et les cellules primaires 3 - Analyser les constituants protéiques des foyers gamma-H2AX 4 - Déterminer si les siRNA identifiés lors du crible, altèrent l’efficacité de réparation de l'ADN et sensibilisent les cellules aux irradiations