VALIDATION D'UNE APPROCHE INNOVANTE POUR LE DIAGNOSTIC PRENATAL NON INVASIF DE LA TRISOMIE 21 – Metagenex

Notre projet vise la validation technique et clinique d'une méthode innovante et non invasive (sans risque de fausse-couche) de dépistage précoce de la Trisomie 21 fondé sur le tri et l'analyse des cellules foetales qui circulent dans le sang maternel. Le principe de cette méthode a déjà été appliqué avec succès au diagnostic prénatal non invasif (DPN NI) de l'Amiotrophie Spinale et de la Mucoviscidose
Le dépistage prénatal des anomalies chromosomiques, et notamment de la trisomie 21, est une priorité en termes de Santé Publique. Dans la région Ile de France, par exemple, la multiplicité des tests de dépistage aboutit à un grave problème de Santé Publique avec la réalisation d'une amniocentèse chez plus de 15 % des femmes enceintes. Ce problème est autant économique pour la collectivité, que médical et familial pour ces femmes, puisqu'un fétus normal sur cent décèdera avant la naissance des suites d'une amniocentèse.
Le projet prévoit l'optimisation de méthodes déjà développées pour obtenir le DPN NI de la trisomie 21 (FISH/Prins, CGH, PCR quantitative) et leur validation technique in vitro sur cellules trisomiques, puis clinique sur des prélèvements de mères avec enfant trisomique (validation de la sensibilité et de la spécificité de la méthode).
Metagenex développe une approche innovante, ISET, qui isole les cellules foetales circulantes (CFC) (trophoblastiques) sur la base de leur taille (Vona, 2000, 2002). Cette approche a montré sa validité pour le diagnostic prénatal non invasif (DPN-NI) de l'Amiotrophie Spinale et de la Mucoviscidose. Des résultats préliminaires montrent que son application au DPN-NI de la Trisomie 21 est réalisable. Il n'y a pas de vrai compétition à l'heure actuelle, car aucune équipe concurrente a montré de pouvoir fournir un diagnostic prénatal fiable, reproductible et ustilisable en routine. ISET et ses applications ont fait l'objet de quatre brevets.
Metagenex assure : développent et validation du test, commercialisation de l'appareil ISET, développement d'un appareil ISET dédié cellules foetales , de kits et de l'automatisation du test ISET pour le DPN-NI de la Trisomie 21.
L'INSERM U807 assure les recherches nécessaires à la mise au point du nouveau test, l'organisation des validations techniques et cliniques.
Le Lab. de Cytogénétique de l'Hôp. NEM (Prof. M. Vekemans, Dr. S. Romana) développe des puces (CGH array) dédiées au test ISET de DPN-NI de la Trisomie 21. Le Lab. de Génétique de l'Hôpital NEM collabore aux tests de génotypage des cellules isolées par ISET.RESUME PROJET – Principales etapes, jalons, livrables, solutions alternatives
Ce projet s'articule en 3 étapes d'une durée totale de trois ans.
Etape 1 (18 mois): optimisation des approches (FISH/PRINS, CGH-cellule unique et PCR quantitative) pour le DPN-NI de la trisomie 21. Rôle de l'Unité INSERM 807 (recherche méthodologique), de Metagenex (tests d'optimisation), du lab de Génétique (génotypages) et de Cytogénétique (CGH array). A la fin de l'étape 1, le 1er jalon est constitué par l'optimisation du test en PCR quantitative et du test en CGH-cellule unique pour le DPN-NI de la trisomie 21, le développement d'un appareil ISET dédié à l'isolement des CFC. Niveau de risque : très bas car nos résultats préliminaires indiquent la faisabilité de ces deux approches. En cas de problème non envisageable pour une méthode, l'autre méthode aura la priorité. Le développement de l'appareil ISET dédié CFC ne présente pas de risque.
Etape 2 (6 mois): validation technique des méthodes automatisées: rôle de : Unité INSERM 807(organisation et coordination de la validation), Metagenex (réalisation des tests), Lab de Cytogénétique (CGH array). A la fin de l'étape 2, le livrable est la validation technique de une ou plusieurs d