Obtention de lapins transgéniques modèles utilisant la technique des ARNi pour valider l'Apobec-1 comme une nouvelle cible anti obésité – FATSTOP

L'intérêt scientifique de ce projet repose sur l'approche innovante choisie par ObeTherapy pour identifier de nouveaux gènes pouvant être utilisés comme cible thérapeutique pour l'obésité.
Cette approche va à contre-courant de tout ce qu'il se fait actuellement dans le domaine de l'obésité. Au lieu de s'intéresser à ce qui caractérise génétiquement les individus obèses, ObeTherapy s'intéresse au phénotype maigre. Cette approche a permis d'identifier une famille de gènes impliqués dans l'absorption de l'ensemble des graisses. Ces gènes sont des cibles thérapeutiques à forts potentiels car ils ne sont pas redondants comme le prouve le caractère monogénique de ces pathologies. De plus, leur expression, limitée au tractus digestif, et leur fonction, spécialisée dans l'absorption des graisses, en feront des cibles idéales.
Résultats préliminaires : l'obtention de lapins transgéniques exprimant le gène Apobec-1 humain dans l'intestin et le foie aboutit au phénotype obèse. Ce travail a été mené en collaboration avec l'INRA.
Objectifs du projet : i) obtenir des lignées de lapins exprimant dans l'intestin uniquement le gène Apobec-1 humain, ii) valider la cible Apobec-1 par extinction du gène en utilisant la technologie du RNAi, les lapins devant être maigres, iii) croiser les lapins n'exprimant plus Apobec-1 de lapin avec ceux exprimant exprimant Apobec-1 humain. Ce nouveau modèle permettra de valider les composés chimiques déjà sélectionnés.RESUME PROJET – Caractere innovant / avantage concurrentiel / contexte scientifique et concurrentiel international& La stratégie innovante de ObeTherapy s'appuie sur l'identification des gènes cibles associés au phénotype maigre par opposition à l'approche des concurrents basée sur l'étude des phénotypes obèse. Cette stratégie a permis l'identification d'une activité enzymatique responsable de l'absorptiion intestinale des lipides, nutriements qui contribuent en majorité à l'apport énergétique. Cette enzyme, Apobec-1 est exclusivement exprimée dans l'intestin chez l'humain et chez le lapin contrairement aux gènes de l'obésité dont les fonctions sont redondantes et qui ne sont pas spécifiquement exprimés par un seul tissu.
Le lapin est un excellent modèle pour l'étude des maladies humaines liées aux désordres du métabolisme des lipides. C'est un meilleur modèle que le rat et la souris, chez lesquels l'Apobec-1 est synthétisée par d'autres tissus que l'intestin.
Le partenaire INRA est l'un des laboratoires au monde capable de produire en routine des lapins transgéniques. La technologie RNAi a jusqu'à présent été peu utilisée en transgénèse chez la souris et encore jamais chez le lapin. Cette technologie est actuellement la seule capable d'inhiber l'expression d'un gène endogène chez cette espèce.

RESUME PROJET – Partenariat (competence, complementarite)& Obetherapy est impliquée depuis sa création dans la recherche de nouveaux médicaments anti obésité. Les molécules recherchées sont des inhibiteurs de l'Apobec-1 qui est responsable de la synthèse de l'ApoB48. Cette protéine participe à la formation des chylomicrons qui transportent les lipides alimentaires vers le foie.
Le partenaire INRA a un savoir faire de longue date dans la préparation de vecteurs permettant une expression fiable des transgènes et dans l'obtention de lapins trangéniques pour l'étude de maladies humaines et pour la préparation de protéines recombinantes.
Ces deux laboratoires ont déjà obtenu des premiers lapins surexprimant l'apobec-1 humaine devenant obèses.RESUME PROJET – Principales etapes, jalons, livrables, solutions alternatives& Les étapes sont les suivantes
1 - construction de vecteurs permettant une surexpression ciblée du gène de l'apobec-1 humaine dans les entérocytes de lapin
2 - établissement de lignées de lapins exprimant ce gène et observations des animaux
3 - recherches de séquences de ARNi capables d'inactiver l'ARNm de l'Apobec-1 de lapin. Validation par transfection cellulaire.
4 - construction de vecteurs