IMMUNOTHERAPIE ACTIVE ANTICYTOKINE DANS DES MODELES DE POLYARTHRITE RHUMATOIDE – CYTOVAC

La polyarthrite rhumatoïde (PR) est une maladie chronique dont la prévalence est de l'ordre de 0.3 à 0.5% de la population, se traduisant par une destruction inflammatoire des articulations. La démonstration du rôle des cytokines de l'inflammation a entraîné le développement de traitements ciblés actifs notamment anti-TNFalpha et anti-IL-1. L'immunothérapie active est une alternative consistant, dans cette pathologie, à développer un concept de vaccination thérapeutique anti-cytokine. Nos résultats préliminaires encourageants nous conduisent à poursuivre nos travaux, dans des modèles expérimentaux de PR, avec deux bras distincts complémentaires . L'un consiste à utiliser une stratégie utilisant une cytokine entière, le TNFalpha hétérocomplexé au KLH . L'autre définit sur les cytokines (IL-1 et TNFalpha) des peptides interagissants avec leur récepteur (in silico) ; ces peptides synthétisés sont couplés au KLH et constituent un vaccin ciblé.
Nous avons obtenus des résultats préliminaires pour chacun des deux bras de notre travail. D'une part, en couplant le KLH au TNFalpha humain, nous avons observés une réduction importante et significative des arthrites des souris transgéniques pour le TNFalpha humain (TTg).D'autre part, avec les cytokines murines, un peptide du TNF démontre son potentiel vaccinal en inhibant le déclenchement du choc léthal au TNF chez la souris ; un peptide de l'IL-1 diminue les arthrites dans le modèle d'arthrite au collagène chez la souris (AEC). Nous poursuivons nos travaux dans les deux directions. 1) Avec le TNFalpha entier nous allons d'une part chercher à démontrer son action dans un modèle aigu TNFalpha dépendant, le choc léthal au TNFalpha chez la souris TTg ; d'autre part nous allons effectuer un travail de cinétique à long terme pour l'effet de la vaccination sur les arthrites chroniques spontanées des souris TTg, en évaluant l'intérêt de cette vaccination sur la clinique, l'histologie articulaire, la destruction ostéoarticulaire (densitométrie et dosages des D-Pyr), la production de cytokines par les synoviales inflammatoires et la rate (qRT-PCR temps réel et dosages par luminomètre). La réponse T anti-TNFalpha et le dosage des anticorps neutralisants seront également effectués, points clefs d'efficacité et de sécurité. 2) Nous allons explorer également la stratégie de vaccination par des peptides d'IL-1 ou de TNFalpha ; l'étude préalable in silico permet d'affiner la définition des sites d'interaction (séquences murines) avec le récepteur pour choisir les peptides à synthétiser. Ces peptides murins recombinants seront couplés au KLH. Puis seront étudiés avec les peptides définis la capacité de vaccination dans des modèles murins, de choc TNF-dépendant (pour les peptides du TNFalpha seulement), ou d'AEC (pour les peptides issus des deux cytokines), avec des paramètres d'évaluation comparable à ceux utilisé pour la stratégie « cytokine entière » du modèle TTg.
A l'issu du présent projet, nous saurons si le concept de vaccination anti-cytokine, s'applique dans nos modèles d'une part à la vaccination dirigée contre le TNFalpha (humain), d'autre part à un ou plusieurs peptides de l'IL-1 ou du TNFalpha (modèles murins). Nous connaîtrons la durée d'action des anticorps neutralisants et aurons les éléments des paramètres de l'efficacité en fonction du temps : inflammation, destruction tissulaire, production de cytokines. La réponse T sera également connue, paramètre important de la sécurité d'emploi ; les conditions de vaccination pour obtenir une réponse T faible et une faible durée de production d'anticorps doivent être obtenus pour une sécurité permettant d'envisager ultérieurement un essai dans la PR sévère réfractaire. Nos données sont également utiles au développement des stratégies thérapeutiques nouvelles de l'ensemble des maladies chroniques inflammatoires (comme la maladie de Cr