ETUDE DE LA PATHOGENESE ET DES TREATMENTS DE LA NEPHROPATHIE A IgA A L'AIDE DE MODELES ANIMAUX HUMANISES – IGA-N

RESUME PROJET – Contexte scientifique et objectifs: La N-IgA est une des premières causes d'insuffisance rénale. Les patients présentent des IgA1 anormalement glycosylées et sous forme de complexes immuns. Les IgA1 anormales induisent la libération de RFcalphaI (CD89) soluble qui participerait à la formation de complexes circulants contenant des IgA1. Ces complexes se déposent secondairement dans le mésangium probablement par la fixation au récepteur de la transferrine (CD71), sur-exprimé sur les cellules mésangiales des patients.
L'objectif de ce projet est l'étude des anomalies des IgA1 (glycosylation et formation des complexes) dans la N-IgA en développant de nouveaux modèles de la N-IgA à l'aide de souris humanisées. Notre approche est basée sur la production et le croisement de deux lignées de souris: 1) souris déficientes en IgA murines qui expriment des IgA1 humaines (knock-in) et 2) souris Tg pour le CD89 humain, ainsi que sur la reconstitution du système immunitaire des patients chez la souris.RESUME PROJET – Description: Notre projet de recherche comporte cinq volets :
1) Etudier les aspects physiologiques de la réponse IgA1 chez les souris knock-in pour l'IgA1 humaine (alpha1-KI) que nous avons produites. Sera analysé en particulier le degré de polymérisation des IgA1 dans le sérum. Les variations de la glycosylation des IgA1 et/ou de leur tendance à s'accumuler dans le mésangium rénal seront également étudiées après infection virale, après ingestion de deoxynivalenol (vomitoxine) ou après immunisation par un antigène alimentaire (ces éléments étant connus comme potentialisant la survenue de dépôts d'IgA). D'autres modèles transgéniques de production d'IgA1 humaines seront également mis au point, d'une part en réalisant l'humanisation de la chaîne J, en vue de produire des IgA polymériques totalement humanisées, d'autre part en réalisant des animaux exprimant une IgA1 monoclonale clonée chez un patient atteint de myélome et de néphropathie à IgA.
2) Déterminer le rôle de la glycosylation de l'IgA1 humaine dans la N-IgA à l'aide de souris humanisées Rag 2-/-gamma c-/- ou NOD.SCID greffées avec des précurseurs CD34+ purifiés du sang de patients N-IgA. Ces cellules seront injectées dans le foie de souriceaux nouveau-nés.
3) Déterminer le rôle du CD89 soluble et des complexes d'IgA1-CD89 dans la formation des dépôts mésangiaux d'IgA1 humaines chez des souris doublement Tg (Tg-CD89 et alpha1-KI). La maladie sera induite (ou aggravée) par injection i.v. de l'antigène (Ag) après immunisation par voie systémique ou orale permettant selon le type d'interaction des complexes d'IgA1 avec le CD89, la libération de CD89 soluble complexé aux différents complexes IgA1-Ag.
4) Etudier le rôle de complexes immuns à IgA1 dans des souris exprimant une IgA1 humaine anti-lactoferrine clonée d'un patient présentant un purpura rhumatoïde avec N-IgA.
5) Immuno-intervention avec des anticorps qui ciblent le RFcalphaI de manière monovalente.RESUME PROJET – Resultats attendus: Nous attendons une meilleure compréhension du rôle des anomalies des IgA1 et de leur récepteur CD89 dans la physiopathogénie de la N-IgA et la mise au point de nouvelles approches thérapeutiques efficaces. Ceci sera permis par l'établissement de ces nouveaux modèles animaux humanisés qui autoriseront des analyses approfondies et des tests impossibles à réaliser chez l'Homme. Nos résultats préliminaires aattestent de la faisabilité du projet puisque nous avons d'ores et déjà obtenu des souris double Tg qui présentent des dépôts d'IgA1 importants dans le mésangium et augmentés après immunisation. Nous nous attendons a developper des modèles de N-IgA accélerée et également à identifier les voies impliquées dans les anomalies de glycosylation des IgA1 dans la N-IgA ainsi que leur capacités à former des complexes néphrotoxiques.