– SIGNATOR

Le but de ce programme est de comprendre les rôles et mécanismes d'action des récepteurs de l'hormone thyroïdienne (TR). Ces récepteurs appartiennent à la grande famille des récepteurs nucléaires qui sont des facteurs de transcription. Après liaison de l'hormone triiodothyronine, T3, ces récepteurs deviennent capables de moduler la transcription de gènes cibles dans la chromatine en se fixant sur les gènes cibles au niveau de séquences nucléotidiques spécifiques, les TRE. Les TR sont codés par deux gènes différents, respectivement TRa et TRb. Ces deux gènes codent chacun pour plusieurs isoformes don t les mécanismes d'action et les rôles respectifs ne sont pas encore tous connus. L'hormone T3 joue un rôle majeur dans le développement des vertébrés. Chez le Xénope, la T3 induit la métamorphose. Chez la souris l'hormone induit durant la période périnatale des évolutions importantes dans certains tissus. Dans ce programme nous développons une analyse comparative entre Xénope et souris sur des tissus qui sont des cibles majeures de la T3 : systèmes nerveux central (SNC), tractus gastro-intestinal (GI) et système adipocytaire et métabolisme graisseux. Pour chacun de ces systèmes biologiques nous prévoyons d'analyser les aspects suivants : § Rôle des isoformes dans le développement et le fonctionnement du tissu, § Recherche de gènes cibles des TR, § Recherche des complexes protéiques associés aux TR sur les gènes cibles, § Recherche des mécanismes contrôlant la disponibilité de T3 dans les tissus. Pour remplir cet objectif le projet repose sur des analyses biochimiques et physiologiques. Une stratégie majeure est la combinaison d'approches biochimiques et biologiques intégratives au niveau de l'organisme in vivo. Pour cela nous utiliserons de nombreux modèles de Xénope et de souris génétiquement modifiés (transgéniques, mutations génomiques ciblées, animaux rapporteur de la réponse à T3, animaux exprimant des récepteurs marqués biologiquement) Dans le système nerveux central nous étudierons le rôle de certaines isoformes de TR dans le développement du cervelet. Nous étudierons aussi le control de la délivrance de la T3 à partir du liquide céphalorachidien. En effet la production et/ou la dégradation micro localisée de la T3 ainsi que son control d'entrée dans les cellules par des transporteurs membranaires jouent des rôles certainement majeurs dans l'activation finement contrôlée de certains gènes dans certaines cellules à l'intérieur d'un même tissu. Nous étudierons aussi le rôle des TR dans le développement des cellules souches neurales. Dans le tractus gastro-intestinal, nous étudierons les mécanismes par lesquels le récepteur TRa active la prolifération des cellules épithéliales précurseurs dans les cryptes. Nous étudierons aussi les interactions fonctionnelles possibles entre les TR et d'autres voises de signalisation contrôlées par Notch et Wint. Enfin nous rechercherons l'implication des TR dans le control du développement des cellules souches épithéliales des cryptes intestinales. Dans le tissu adipeux nous analyserons le rôle des TR dans la différenciation des tissus adipeux blancs et bruns ainsi que dans le métabolisme énergétique dans différentes conditions nutritionnelles. Les récepteurs TR jouent aussi un rôle important en absence de leur ligand. Ils sont généralement dans ces conditions des répresseurs transcriptionnels. Nous analyserons les mécanismes de liaison de ces récepteurs sans ligand à la chromatine et leurs interactions avec des complexes protéiques. De toutes ces études nous espérons les données suivantes : § Identification de gènes cibles des TR § Identification des complexes protéiques associés aux TR sur des gènes spécifiques § Identification des mécanismes de control de la délivrance de T3 dans les tissus § Identification de nouveaux rôles de s TR dans les trois systèmes biologiques étudiés § Compréhension des mécanismes moléculaires d'action des TR en absence de ligand. Nous devrions ainsi produire de