Mécanisme d'action de drogues antiprion : processus d'apparition/maintien des amyloides et leur rôle dans la pathologie – panpriondrug

Des protéines prions ont été découvertes chez les mammifères, le champignon filamenteux Podospora anserina et la levure Saccharomyces cerevisiae. Nous avons mis en place un crible simple, rapide et efficace permettant d'isoler des molécules anti-prion. Cette méthode est basée sur le criblage de chimiothèques pour y sélectionner des composés actifs contre deux prions de levure. Un des résultats les plus marquants des premières campagnes de criblage réalisées a été que l'essentiel des molécules actives contre les prions de levure se sont également avérées actives contre le prion de mammifère dans différents modèles cellulaires mais aussi in vivo dans un modèle murin. Ces résultats valident notre méthode de criblage basée sur la levure pour isoler des molécules actives contre le prion de mammifère et suggèrent que, de façon remarquable, les cibles des drogues anti-prion (et donc les mécanismes de prionisation) sont conservées de la levure aux mammifères. Les objectifs de notre projet sont : - 1. l'identification de ces mécanismes conservés de prionisation par des approches de criblage inverse. Des approches génétiques permettront d'isoler les gènes impliqués dans le mécanisme de cure. Des approches biochimiques basées sur la chromatographie d'affinité sur drogues anti-prion immobilisées permettront d'identifier leurs interactants. L'identification des cibles des drogues représentera non seulement une avancé significative dans la compréhension des mécanismes généraux mis en jeu mais ouvre également la possibilité d'engager des cribles in vitro ciblant directement l'activité des facteurs identifiés, - 2. il s'agira par ailleurs d'étudier l'effet des drogues anti-prion dans le modèle prion de P. anserina pour essayer de généraliser leur effet à tout les systèmes prions caractérisés à ce jour. Ce système présente un certain nombre de caractéristiques qui le rendent attractif. En particulier le fait que la protéine prion déclenche une réaction de mort cellulaire, ce qui en fait un système de choix pour étudier dans un micro-organisme des mécanismes fondamentaux de toxicité des amyloïdes. D'autres part, ce système commence à être très bien caractérisé au niveau structural, - 3. on s'attachera à analyser l'effet des drogues anti-prions isolées dans différents modèles cellulaires ou animaux de maladies neurodégénératives à dépôts protéiques, - Ce projet s'appuie sur l'utilisation croisée de molécules anti-prions nouvellement identifiées dans différents systèmes prions connus à ce jour. En s'intéressant spécifiquement aux aspects conservés dans ces différents modèles, nous devrions avoir accès aux mécanismes fondamentaux de la prionisation. -