Transparisation ultra-rapide et microscopie biphotonique à disque rotatif unique pour l’analyse tridimensionnelle d’échantillons en neuropathologie – KIARA

Dans les laboratoires de neuropathologie, le traitement des échantillons est un processus long qui demande de nombreuses étapes pour obtenir des coupes fines du tissu qui sont ensuite colorées puis observées par un pathologiste qualifié la plupart du temps sur un microscope conventionnel à fond clair. Le diagnostic est posé après une observation méticuleuse de seulement quelques coupes prises dans différentes régions de l’échantillon (biopsie, pièce d’exérèse, …). Cette procédure de routine peut entrainer un diagnostic partiel et parfois des erreurs notamment dans le contexte de pathologies qui se développent dans un environnement tissulaire complexe en 3 dimensions et/ou dans des structures rares dans le volume de l’échantillon observé.
Le but du projet est de développer et d’adapter la microscopie biphotonique à disque rotatif unique pour l’examen neuropathologique : 1) pour augmenter le volume imagé et interprété par le pathologiste dans un court laps de temps et 2) pour fournir des images avec une plus grande quantité d’informations afin d’améliorer le diagnostic et de mieux comprendre la pathologie. Pour cela nous développerons des méthodes de clarification et de coloration rapide, des adaptations instrumentales sur le microscope et des protocoles d’imagerie rapides. L’intérêt de l’approche sera démontré pour la recherche fondamentale (organisation et connectivité du système nerveux entérique) et pour la clinique (diagnostic précoce de la maladie de Parkinson à partir de biopsies intestinales).