révéler le mécanisme de fonctionnement d'un transporteur de multiples drogues de Streptococcus pneumoniae impliqué dans la RésIStancE aux fluoroquinolone – Multidrug-RISE

Les transporteurs de multiples drogues sont des acteurs essentiels de la résistance aux antibiotiques. Malgré une meilleure compréhension de leur mécanisme d’action, comment ces transporteurs fonctionnent in vivo (en fonction de la biodisponibilité des drogues dans la bactérie) et quel est leur mécanisme de fonctionnement à l’échelle moléculaire (reconnaissance des drogues, mécanisme d’hydrolyse des nucléotides ?) restent mystérieux. Nous nous focaliserons sur un transporteur ABC (“ATP-Binding Cassette”) de multiples drogues de Streptococcus pneumoniae impliqué dans la résistance en milieu hospitalier aux fluoroquinolones (FQ). Ce transporteur possède un mécanisme de fonctionnement asymétrique, ses deux sites nucléotidiques n’étant pas fonctionnellement équivalents. Il montre également une préférence marquée pour le GTP comme source d’énergie, contrairement à la plupart des protéines ABC classiques, définissant ainsi une nouvelle sous-famille de transporteurs ABC. Nous étudierons des questions essentielles concernant (i) les déterminants moléculaires qui dictent sa préférence pour le GTP ; (ii) le mécanisme précis d’hydrolyse du GTP et de l’ATP et le rôle respectif de ses deux sites nucléotidiques dans ces processus ; (iii) l’interaction présumée avec la nucléoside diphosphate kinase et comment cela renforce sa préférence pour le GTP et (iv) la poly-spécificité de reconnaissance et d’efflux des FQ en intégrant les reconnaissances moléculaires propres au transporteur et la bio-disponibilité des FQ dans la bactérie. Nos résultats permettront de mieux comprendre le fonctionnement et l’implication d’un transporteur de multiples drogues dans la résistance aux FQ en milieu hospitalier.