DYNAMIQUE ET STRUCTURE DE LA MACHINERIE c-NHEJ: RÔLES PIVOTS DE L'ADN LIGASE 4 HUMAINE – NHEJLIG4

L'objectif du projet NHEJLIG4 est d’apporter une meilleure compréhension du mécanisme de la voie NHEJ classique (c-NHEJ) en mettant l'accent sur les interactions dynamiques impliquant l'ADN Ligase 4 (LIG4). Dans les cellules de mammifères, la c-NHEJ est la voie prédominante pour la réparation des cassures double brin de d'ADN telles que celles induites lors de la recombinaison V(D)J durant la réponse immunitaire adaptative ou celles induites par divers clastogènes comme les rayonnements ionisants. Bien que la plupart des effecteurs de la machinerie de base de la c-NHEJ soient connus, leurs rôles spécifiques ainsi que la dynamique de leurs interactions restent encore mal compris. Afin de mieux comprendre la dynamique d’action de la machinerie de la c-NHEJ lors de ses interactions avec les cassures double brin de l'ADN, nous combinerons ici des approches biochimiques d’ensemble avec des approches de visualisation en molécules uniques, et des approches structurales. De plus, les transactions dépendantes de la LIG4 seront étudiées à l'intérieur des cellules. Les objectifs spécifiques seront de déterminer le mécanisme moléculaire par lequel la protéine XLF stimule le complexe LIG4/XRCC4 de manière dépendante de Ku. En outre, nous définirons la base moléculaire de la fonction structurelle et non catalytique du complexe LIG4/XRCC4. Les résultats issus de ce projet interdisciplinaire permettront d’obtenir une compréhension mécanistique détaillée de la fonction et de la régulation du complexe LIG4/XRCC4 qui permettra de mieux comprendre l’extraordinaire flexibilité et adaptabilité de la machinerie de la c-NHEJ lors de la réparation des cassures double brin de l’ADN.