Le rôle de la cycline D1 dans la lymphopoïèse. – Cyclin D1

Les Cyclines D ont un rôle fondamental dans l'initiation de la division cellulaire en réponse aux stimuli de l'environnement. Il est supposé que tous les membres individuels de cette famille (D1, D2, D3) ont du rôle redondant, mais seul la modification de l'expression de la ciclin-D1 est une cause fréquente de transformation. Nous avons étudié des souris ou la « cyclin-box » de la D1 à été éliminé par recombinaison homologue. Nous avons trouvé que ces souris pouvaient avoir deux phénotypes opposés, qui corrèlent avec une absence; ou une expression anormale de la portion C' terminal de la D1, codé par les exons 4, 5. Cette portion de la protéine C' à des fonctions de régulation de la transcription. Quand ce domaine était absent, les souris n'exprimaient pas D2 ni D3 et ses précurseurs hématopoïétiques ne se divisait pas et ne se différenciaient pas en cellules de la lignée lymphoïde. Par contre, les souris exprimant la protéine D1 tronquée exprimaient des niveaux anormaux de D2 et D3, une hyper prolifération et pouvait développer une hyperplasie lymphoïde. Ses résultats suggèrent que D1 puisse être une « master cyclin » dans la transition G1/S et aussi que ce rôle est médié par la portion terminal de la protéine. Ce projet à pour but : 1) Démontrer directement que l'absence de D1 induit le blocage de différenciation lymphoïde, en éliminant D1 par « RNA interférence » 2). Déterminer si D1 est directement impliqué dans l'expression de D2/D3 par « Chip analysis ». 3) Quantifier par microscopie confocale la distribution de la D1 tronquée dans tous les tissus, et évaluer sa capacité de migrer vers les noyaux après activation cellulaire. 4) Forcer une expression élevée de la protéine tronquée dans des lignées cellulaires et dans des précurseurs hématopoïétiques et déterminer l'effet de cette expression dans la division et différenciation cellulaire. 5) Déterminer si une expression anormale de protéine tronquée peut être impliqué dans le cancer, en comparant les niveaux relatifs de cette forme tronquée et de la protéine normale dans différents tissus et dans des lignées de cellules cancéreuses. En dépit d'un effort massif, les mécanismes par lesquels D1 favorise la transformation ne sont pas compris. Ce projet peut être une percée tout à fait nouvelle, parce qu'il ouvre des perspectives inespérées sur le rôle D1 et de son domaine C' dans le contrôle de la division cellulaire en réponse aux stimuli de l'environnement.