Rôles structuraux et fonctionnels de la transglutaminase tissulaire dans la fibrose vasculaire et rénale hypertensive. Etude par microscopie multimodale intravitale avec génération de seconde harmonique.TRANSCOLA – TRANSCOLA

RESUME PROJET – Contexte scientifique et objectifs: L'hypertension artérielle (HTA) induit une fibrose et une rigidité accrue des artères de gros calibre qui sont des marqueurs de risque cardiovasculaire et d'insuffisance rénale. Il existe une interdépendance entre la rigidité artérielle extra-rénale et la progression de l'insuffisance rénale. L'accumulation de collagène I fibrillaire au sein de l'interstitium détruit le rein. L'HTA s'accompagne d'une induction de l'activité de la transglutaminase tissulaire (TG2) qui pourrait participer à la progression de la fibrose. Grâce à une nouvelle technologie de mesure physique quantitative de la fibrose, nous observons sa remarquable hétérogénéité ainsi qu'une discordance spatiale entre les sites de synthèse du collagène I et les sites de l'assemblage fibreux. Notre projet multidisciplinaire a pour objectif d'évaluer in vivo le rôle des processus d'assemblage du collagène I, sous le contrôle de la TG2, sur les relations structure-fonction des grosses artères et de la fibrose rénale.RESUME PROJET – Description: Ce projet multidisciplinaire utilisera un modèle d'hypertension artérielle expérimentale par perfusion d'angiotensine II qui provoque des lésions vasculaires périphériques et rénales sévères. Ce modèle permettra d'étudier et de comparer les sites cellulaires de synthèse du collagène I, l'expression de marqueurs de phénotype myofibroblastique (grâce à des gènes rapporteurs validés par immuno-histochimie et hybridation in situ) et de l'enzyme transglutaminase tissulaire (TG2) dont le role dans la résistance à la protéolyse de la matrice extra-cellulaire a été évoqué. Nous allons suivre et caractériser ces paramètres prinicipaux dans le temps chez des animaux étudiés par une technique exceptionnelle d'imagerie quantitative, spatiale intravitale. Les reins et les artères de conductance (carotides, aortes) seront analysés du point de vue fonctionnel. La régulation rénale et vasculaire de la TG2 sera étudiée. La voie NF-kB, inflammatoire et impliquée dans la mechano-transduction vasculaire et les facteurs d'ischémie (densité capillaire et flux sanguins rénaux locaux) seront analysés afin de déterminer leur rentissement sur la progression de la fibrose. Le rôle de la TG 2 sera évalué par comparaison de la progression de la fibrose rénale et artérielle et de sa régression éventuelle chez les animaux génétiquement déficients pour cette enzyme. Enfin, nous tenterons de compléter la preuve de concept thérapeutique que l'inhibition de l'assemblage des fibres de collagène pourrait être une nouvelle voie de traitement des fibroses établies.RESUME PROJET – Resultats attendus: 1/ Identification des types cellulaires en cause dans la synthèse de collagène I dans les artères et les reins au cours de l'HTA. Etablissement de discordances ou de régulations différentielles des processus de synthèse (activité transcriptionnelle du gène proCOLI(a1)) et d'assemblage des fibres de collagènes (quantifiées par le second harmonique en microscopie multiphotonique).
2/ Identification des zones de recrutement de la voie NF-kB sous l'effet de l'AngII et des contraintes mécaniques. Identification des sites et mécanismes de régulations de la TG2.
3/ Susceptibilité des souris TG2 -/- à la régression de la fibrose par opposition aux souris normales. Preuve de concept thérapeutique au moyen de l'administration d'un antagoniste spécifique de la TG2 qui devrait permettre de prévenir la progression voire d'obtenir la régression des fibroses vasculaires et rénales.