Etude de la physiologie et de la fonction des Lymphocytes « Mucosal Associated Invariante T » ou MAIT, une sous population de lymphocytes conservée au cours de l'évolution – MAIT

RESUME PROJET – Contexte scientifique et objectifs
Il n'y a que deux sous populations de lymphocytes T dont le répertoire et l'élément de restriction soient conservés phylogénétiquement : les NKT et les cellules T invariantes associées aux muqueuses (MAIT). Nous avons découvert et caractérisé cette dernière dont les propriétés sont les suivantes :
- Très abondante dans le sang et l'intestin de la vache et l'homme, un peu moins dans l'intestin de souris
- Caractérisée par une chaîne alpha du TCR invariante
- Sélectionné par les cellules B
- Restreinte par la molécule MR1, molécule de CMH Ib extrêmement conservée entre espèce
- Nécessitant la flore commensale (absente des souris axéniques)
La fonction des cellules MAIT est inconnue mais la très forte conservation de la chaîne TCRalpha et du CMH entre espèces indique qu'elle importante: homéostasie de l'épithélium intestinale ou contrôle de la classe de la réponse immune. Elles pourraient aussi être impliquées dans la défense contre un pathogène ubiquitaire

RESUME PROJET – Description
Nous utiliserons les outils que nous avons développés ou obtenus de collaborateurs pour étudier des questions fondamentales concernant la physiologie des cellules MAIT. Pour ce faire nous caractériserons par FACS les souris transgénique (Tg) ou KO, feront des expériences de transfert ou des chimères hématopoïétiques et des études fonctionnelles in vitro ou in vivo.
En plus des hybridomes T Va19+ et des souris MR1 KO déjà publiés, nous avons obtenu:
- Des souris Tg pour la chaîne TCRa Va19 invariante qui ont une augmentation des LT dans l'intestin et dont le répertoire est biaisé vers Vb6 et Vb8 reproduisant le phénotype sauvage. En fonds MR1 déficient ce biais est perdu suggérant qu'au moins 50 % des cellules sont spécifiques de MR1. Ces souris sont disponibles en fonds Calpha KO et CD45.1 permettant de suivre les cellules dans les expériences de transfert.
- Des souris Tg pour la chaîne Vb6 provenant d'un hybridome Va19. Trois fondateurs exprimant le Tg sont en cours d'étude. Ils sont croisés sur fonds Va19 rag KO CD45.1 ce qui nous donnera des populations monoclonales que l'on pourra suivre après transfert dans des souris KO pour des interleukines ou des molécules du CMH (incluant MR1).
- Des souris TAP/Ii double KO axéniques. La reconstitution de ces souris avec des flores monobactériennes ou leur gavage avec des ligands de NOD ou de TLR nous permettra de définir les mécanismes du recrutement des MAIT par la flore dans l'intestin.
- Une série d'anticorps monoclonaux spécifiques pour Va7.2. Associé à la PCR quantitative, cela nous permettra d'étudier l'implication des MAIT en pathologie.
- Une serie de lignées transfectées par MR1 que nous utiliserons pour caractériser le ligand de MR1 à l'aide d'une librairie peptidique.

RESUME PROJET – Resultats attendus
Dans ce projet, nous étudierons :
- L'ontogénie des cellules MAIT en utilisant les souris Tg TCRa et TCRb et comment la flore commensale est impliquée dans leur accumulation dans l'intestin.
- Le ligand présenté par la molécule de restriction MR1
- La fonction des MAIT chez l'homme et la souris et leur implication dans des situations phyio-pathologiques.
La connaissance de la physiologie des MAIT, de leur implication en pathologie et la caractérisation du ligand de MR1 nous permettra d'envisager leur manipulation dans des situations normales et pathologiques.