Caractérisation des réponses lymphocytaires T et NK au cours de l'infection de l'homme par le virus Ebola – Immuno-Ebola

RESUME PROJET – Contexte scientifique et objectifs
Le sous-type zaire du virus Ebola est responsable chez l'homme d'épidémies meurtrières tuant rapidement jusqu'à 80% des malades, et décimant les chimpanzés et gorilles d'Afrique centrale. Les mécanismes immunologiques de l'infection humaine sont mal connus, car explorés surtout à partir de modèles animaux. L'infection fatale chez l'homme est caractérisée par un effondrement des réponses immunitaires marqué par une destruction des cellules CD8+ par apoptose sans réalité fonctionnelle préalable. Compte tenu du rôle majeur que semblent jouer ces cellules dans l'évolution clinique de la maladie, ce projet propose d'utiliser la position géographique du CIRMF au Gabon, pour explorer les réponses T CD8+ et NK en phases aigue et mémoire. Des études réalisées à partir des cellules de patients infectés s'avéreront cruciales pour la compréhension des facteurs qui gouvernent l'évolution vers la mort ou la guérison.
RESUME PROJET – Description
Le virus Ebola tue 80% des personnes malades. L'effondrement des réponses immunitaires observé chez les personnes qui décèdent de l'infection par le virus Ebola est l'évènement majeur expliquant le taux de mortalité élevé associé au sous-type zaire (EBOVZ). Les cellules TCD8+ sont activées de manière précoce, mais meurent rapidement par apoptose sans avoir préalablement exercé d'activité antivirale. Au contraire, les patients qui guérissent et ceux qui sont asymptomatiquement infectés par le virus, développent une réponse immunitaire adéquate sans destruction lymphocytaire apparente. Afin d'élucider les mécanismes qui gouvernent ces évènement, ce projet propose d'explorer les réponses TCD8+ et NK au cours de l'infection de l'homme par le virus Ebola tant au niveau phénotypique (expression de marqueurs) que fonctionnelle (production de cytokines et activités cytotoxiques).
L'exploration de ces réponses comporte trois volets :
(i) Caractérisation phénotypique et fonctionnelle des lymphocytes T CD8+. D'une part, on cherchera à caractériser les cellules T CD8+ isolées chez des patients en phase aigue de la maladie. D'autre part, on cherchera à caractériser les réponses mémoires des cellules T CD8+ isolées chez les patients survivants, les personnes infectées de manière asymptomatique ainsi que les personnes IgG+ détectées rétrospectivement.
(ii) Identification des épitopes du virus Ebola responsables de l'induction des réponses cytotoxiques. On analysera les réponses mémoires en utilisant des peptides chevauchants de la GP et de la NP, principales protéines virales impliquées dans les réponses cytotoxiques.
(iii) Exploration des cellules NK. On recherchera les éventuelles altérations structurales et fonctionnelles des cellules NK au cours de l'infection in vitro de cellules de patients ayant été infectés par le virus Ebola.

RESUME PROJET – Resultats attendus
La caractérisation des mécanismes qui gouvernent l'activation puis la fonctionnalité des cellules cytotoxiques T CD8+ et NK permettra de comprendre l'ensemble des évènements qui conduisent à la mort ou à la guérison des patients infectés par le virus Ebola. Les lymphocytes n'étant pas infectés par le virus, ces études permettront de déterminer les facteurs, vraisemblablement d'ordre immunologique, responsables de la destruction de ces cellules immunitaires. L'identification des séquences peptidiques responsables de l'induction des réponses cytotoxiques contribuera à la sélection de cibles thérapeutiques. Aucun traitement ni vaccin n'étant disponible aujourd'hui, ce projet permettra in fine le développement de nouvelles stratégies thérapeutique et vaccinale.