– MAGIC Transpo

Notre projet propose de produire une transposase (protéine responsable de la mobilité d’un transposon le long des chromosomes) hyperactive et sable. A court terme, cette transposase pourra être utilisée pour faire du transfert d’ADN in vitro : mutagenèse par insertion, clonage et séquençage (kits de biologie moléculaire pour les laboratoires de recherche & développement). A plus long terme, la transformation de cellules eucaryotes – ex vivo – avec des transposases associées à l’ADN qu’elles doivent insérer dans le génome de la cellule, est une alternative que souhaitent développer les acteurs du transfert de gène (thérapie génique ou fabrication de cellules usines pour la production de protéines thérapeutiques). Quelle que soit l’application envisagée, il existe deux problèmes majeurs à résoudre : la cytotoxicité des transposases hyperactives (pour la bactérie qui les produit), et la grande instabilité des transposases. Au LEPG, nous savons stabiliser les transposases MOS1 (brevet 0512180) et concevoir des transposases MOS1 hyperactives (brevet 0300905 + brevet en cours de dépôt). Notre objectif est donc d’optimiser les conditions de production et de purification d’une transposase MOS1 hyperactive et sable, pour obtenir une protéine en quantité suffisante et permettre son exploitation industrielle.