BIOADAPT 2013 - Adaptation - des gènes aux populations. Génétique et biologie de l'adaptation aux stress et aux perturbations

Régulation de l'interconversion des glycérolipides chez les plantes en réponse aux variations environnementales – Reglisse

Régulation de l'interconversion des glycérolipides chez les plantes en réponse aux variations environnementales

La modification du profil lipidique est étroitement associée à la carence ne phosphate. Il est donc difficile d'évaluer leur réel impact physiologique intrinsèque. Cette proposition va essayer de contourner cette limitation en recherchant au moyen de divers outils génétiques à découpler le remodelage lipidique de la carence en phosphate.

Identification des étapes affectant le remodelage des glycerolipids

Le projet Réglisse repose sur des approches complémentaires: (1) utilisant la génétique conventionnelle et chimique pour altérer le remodelage des lipides; (2) une focalisation sur les éléments contrôlant l'équilibre des glycérolipides au niveau transcriptionel et post-transcriptionel, incluant les changements subcellulaires de certaines enzymes of some enzymes, telle les phospholipases D-zeta, connues pour être modulées par des protéines en réponse à la carence en phosphate; (3) rechercher le mode d'action et les cibles des molécules identifiées dans ce projet; (3) intégrer les résultats obtenus pour évaluer les impacts physiologiques du remodelage des glycérolipides pour économiser le phosphate et rechercher des moyens de contrôler la concentration des phospholipides, des galactolipides et/ou des sulfolipides.

Ce projet est basé sur l'utilisation de la génétique et de la génétique chimique (cette dernière est utilisée pour contourner les problèmes de redondance génétique).

Identification d'un contrôle transcriptionel très rapide
Identification d'une enzyme impliquée dans le remodelage des glycérolipides
identification d'un lien entre le signal Pi et des voies hormonales végétales

Identification de composés végétaux et d'enzymes impliqués dans le déclenchement du remodellage lipidique

Arnaud et al (2014). Identification of phosphatin, a drug alleviating Pi starvation responses in Arabidopsis. Plant Physiol. 166 :1479-1491
Chevalier et al. « Chemical genetics in dissecting membrane glycerolipid functions. In Lipids in Plants and Algae development. Nakamura and Li-Beisson eds. Springer. Subcell Biochem 86, 159-75.
Chevalier et al (2015) Identification par deux criblages simultanés indépendants d’une famille d’inhibiteurs du métabolisme des glycérolipides. Med Sci Paris, 2015, 31(3): 320-327
Bonnot et al (2015). A chemical genetic strategy identify the PHOSTIN, a synthetic molecule that triggers phosphate starvation responses in Arabidopsis thaliana. New Phytol.
Kanno et al. 2016. Performance and Limitations of Phosphate Quantification: Guidelines for Plant Biologists. Plant Cell Physiol. 57, 690-706
Michaud et al. (2016) A tethering complex between mitochondrial membranes is involved in plant lipid trafficking. Curr. Biol. 26(5): 627-639
Botella et al. (2016) ALA10, a phospholipid flippase, controls FAD2/FAD3 desaturation of phosphatidylcholine in the ER, and affects chloroplast lipid composition in Arabidopsis thaliana. Plant Physiol. 170 (3):1300-1314
Rocha et al. (2016) Structural insights and membrane binding properties of MGD1, the major galactolipid synthase in plants. Plant J. 85 (5):622-633
Bastien et al. (2016) New insights on thylakoid biogenesis in plant cells. Int. Rev. Cell Mol. Biol. 323, 2016, 323, 1-30.

Le phosphore (P) est un macro-élément essentiel. Il est présent sous forme de phophate (Pi) dans la majorité des sols, mais en quantité limitante pour la nutrition des plantes. Les engrais phosphatés sont donc massivement utilisés pour augmenter les rendements, avec des effets néfastes sur l'environnement (eutrophisation des cours d'eau).
Mieux gérer la prise et l'utilisation du phosphore chez les plantes afin de réduire l'emploi des intrants phosphatés est donc essentiel. L'objectif du projet REGLISSE vise à augmenter nos connaissances sur la réponse des plantes aux variations de Pi du sol en se focalisant sur les modifications produites affectant le remodelage lipidique des membrane cellulaires. Chez les plantes un tiers du Pi se trouve dans les phospholipides. Confrontée à une carence en Pi, la plante module sa composition lipidique en favorisant la production de galacto- et sulfo-lipides permettant d'économiser le Pi.
Au niveau transcriptionel, de nombreux gènes impliqués dans la dégradation des phospholipides et la synthèses de glycolipides plastidiaux sont modulés par la carence et corrèlent avec ce remodelage lipidique (augmentation de: PLD?1, PLD?2, NPC4, NPC5, SQD2, MGD2, MGD3, PENMT1, DGD2; et baisse de PENMT2, ATS1, ATS2). Tous ces gènes sont impliqués dans l'ajustement de la balance phospholipides versus glycérolipides. Les étapes de ce remodelage lipidique s'effectuent par des mécanismes transcriptionels et post transcriptionels complexes. De nombreuses inconnues subsistent impliquant entre autre un réajustement de voies métaboliques, des inter-conversions de lipides et une modification du trafic intracellulaire.Nous visons l'identification de nouveaux éléments impliqués dans ces processus. Pour ce faire, nous allons produire un référentiel temporel de la mise en place de ces modifications en combinant des analyses de transcriptomique et de lipidomique. Ces études s'appuieront en outre sur des approches de génétique classique et chimique. Nous bénéficions en effet de molécules brevetées par les deux partenaires favorisant l'identification de ces éléments qui restent majoritairement inconnus malgré leur cruciale importance pysiologique. Les composés déjà disponibles sont d'un côté la Phostin et la Phosphatin qui modulent les réponses liées à la carence en Pi et de l'autre la Galvestine-1 qui inhibent la biosynthèse des galactolipides, bloquant ainsi la principale voie affectant les modifications de glycérolipides liées à la carence en Pi. De nouveaux composés chimiques bloquant spécifiquement certaines étapes du remodelage des glycerolipides seront aussi recherchés dans le cadre de ce projet. L'usage de ces drogues et de mutants choisis offre la possibilité de découpler une partie de ces réactions du statut phosphaté de la plante et donc de mieux évaluer leur impact physiologique.
L'objectif de ce projet est d'élucider les mécanismes régulant les profils membranaires en glycérolipides en réponse à la quantité de Pi disponible, d'identifier/valider de nouveaux acteurs de ce processus, d'étudier l'impact physiologique de ces modifications et enfin de rechercher des moyens pour contrôler ces phénomènes. Il ambitionne de produire des connaissances fondamentales qui pourraient avoir des répercussions en agronomie (manipulation du métabolisme lipidique et stratégies permettant de baisser la consommation de Pi chez les plantes).

Coordination du projet

Laurent NUSSAUME (Service de Biologie Végétale et de Microbiologie Environnementale) – lnussaume@cea.fr

L'auteur de ce résumé est le coordinateur du projet, qui est responsable du contenu de ce résumé. L'ANR décline par conséquent toute responsabilité quant à son contenu.

Partenaire

CEA Service de Biologie Végétale et de Microbiologie Environnementale
UMR 5168 CNRS-CEA-INRA-Université J. Fourier Laboratoire de Physiologie Cellulaire Végétale

Aide de l'ANR 469 622 euros
Début et durée du projet scientifique : janvier 2014 - 48 Mois

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