Etude et réduction des interactions hémicellulases-lignine pour le développement de procédés de prétraitement et de fractionnement enzymatiques performants de la lignocellulose – HémiLi

La stratégie mise en oeuvre est basée sur l’étude des interactions de diverses xylanases (naturelles ou modulées par ingénierie) avec un panel de lignines de complexité variable, afin d’établir si la force de ces interactions dépend de la nature des interactants. Un deuxième volet du projet consiste à réduire les interactions xylanases-lignines par optimisation du milieu réactionnel. Du fait de la forte hydrophobie des lignines, le développement de méthodologies adaptées à l’étude de ces interactions constitue un défi technologique majeur. L’approche choisie est la Résonance Plasmonique de Surface (SPR).

Un défi méthodologique a été de préparer des couches stables de lignines à la surface de sensors en or utilisés en SPR. Des approches de greffage covalent et de physisorption ont été testées. Deux de ces approches se sont avérées concluantes pour la préparation des couches de lignines, permettant d’évaluer les interactions par SPR avec diverses xylanases dans la phase liquide. L’ensemble des résultats montrent que plusieurs facteurs favorisent ou au contraire limitent les interactions xylanases-lignines : nature des xylanases, composition des lignines, composition du milieu réactionnel.

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Plusieurs actions de valorisation des résultats sont en cours (3 articles en rédaction, plusieurs communications à des congrès internationaux).

L’objectif du projet Hémili est de focaliser les recherches sur l’impact de la lignine lors du fractionnement enzymatique de différentes sources végétales lignocellulosiques par des xylanases, biocatalyseurs pouvant apporter une plus-value non négligeable pour la production d’éthanol de seconde génération par voie biologique (diminution de la drasticité des prétraitements physico-chimiques de la lignocellulose, valorisation des pentoses). Ces études permettront de lever des verrous cognitifs concernant les mécanismes qui régissent les interactions entre les xylanases et la lignine. La stratégie mise en oeuvre sera basée sur l’étude des interactions de diverses xylanases en présence d’un large panel de lignines de complexité variable par le biais de méthodologies SPR et ellipsométrie. Un volet du projet consistera à réduire les interactions xylanases-lignines par optimisation du milieu réactionnel (additifs). Au terme du projet, l’impact des scenarii retenus (xylanases, lignocelluloses de contenu et qualité en lignine idéaux, additifs) permettant l’établissement d’interactions réduites voire inexistantes entre les xylanases et la composante lignine de lignocelluloses sera évalué en termes de rendement d’hydrolyse de la cellulose et des xylanes par des cocktails enzymatiques.