Détermination des bases moléculaires de l'appareil réplicatif des Archées – ARCHAREP

La capacité des cellules à répliquer des millions de paires de bases d'ADN à chaque division est une fonction biologique essentielle. Tous les êtres vivants, bactéries, eucaryotes et archées effectuent une réplication de l'ADN semi-conservatrice. La réplication de l'ADN est effectuée par des machines multi-protéiques sophistiquées, qui doivent synthétiser de manière continue l'ADN et le copier avec précision au cours du cycle cellulaire. Cette machine multi-protéique et multi-enzymatique est appelée le réplisome. À ce jour, les réplisomes les mieux décrits sont ceux du bactériophage T7, de la levure et des humains. Les archées, qui constituent la branche la plus inexplorée de l'arbre de la vie, possèdent à la fois des caractéristiques bactériennes et des caractéristiques eucaryotes, ainsi que des aspects uniques à ce domaine du vivant. Ce projet vise à atteindre une étape importante dans notre compréhension de la maintenance du génome chez les archées, en reconstituant in vitro un réplisome complet à partir de protéines purifiées et en déterminant la première structure d'une fourche de réplication de l'ADN. Le projet ARCHAREP fournira une base structurale et fonctionnelle solide pour comprendre les interactions moléculaires entre les différents facteurs protéiques qui effectuent la réplication de l'ADN chez les archées. De plus, la reconstitution biochimique d’un réplisome thermostable permettrait de développer un nouvel outil biotechnologique pour la génomique, afin de répliquer de longues molécules d'ADN, au-delà de la limite actuelle d'environ 20 kilobases obtenue actuellement en utilisant uniquement des polymérases.