Rôle des premiers axones thalamocorticaux dans le développement du cortex des primates – ThaCoPrim

Le projet porte sur le rôle des axones thalamocorticaux embryonnaires (TCA) dans la spécification précoce d’aire cytoarchitecturales distinctes dans le cortex des primates, via le contrôle du cycle cellulaire et du destin des progéniteurs. En s'appuyant sur les résultats inédits de Dehay et Molnar, les interactions thalamo-corticales dans la corticogenèse précoce des primates seront explorées via un traçage anatomique in situ et ex vivo, en utilisant des procédures hodologiques modernes et de pointe. L'influence des TCA sur le comportement prolifératif des progéniteurs de la zone subventriculaire externe (OSVZ) du cortex visuel sera examinée in vivo et ex vivo, en utilisant un test de tranche organotypique qui préserve les interactions thalamocorticales. L'imagerie en temps réel sera réalisée pendant deux semaines et l'immunocytochimie sera mise en œuvre pour suivre les paramètres du cycle cellulaire et la différenciation. Notre analyse RNA-Seq en masse, non publiée, a révélé des gènes exprimés de manière différentielle dans les sous-compartiments de l'OSVZ en contact étroit avec le TCA. Les corrélats moléculaires de l'influence de la TCA sur les progéniteurs de l'OSVZ seront explorés plus avant à l'aide de techniques à haute résolution spatiale non biaisées et biaisées (SlideSeq et smFISH). L'expression des gènes candidats sera manipulée ex vivo dans le cadre d'un test de tranche organotypique à long terme, comme le fait régulièrement le laboratoire Dehay, afin de pouvoir évaluer leur fonction. Nous disposons de données préliminaires indiquant que chez les primates, deux cibles principales des axones thalamiques : les neurones de la sous-plaque et ceux de la couche supérieure sont produits de manière concomitante. La manière dont la génération de ces deux populations est influencée par les TCA en croissance sera examinée à l'aide d'une technique d'analyse clonale développée par Molnar, combinée à un profilage de l'expression génétique des progéniteurs et des neurones à résolution unicellulaire.