Excitation et imagerie super-résolution volumétrique confinée à basse température : étude de l’architecture du chromosome durant l’expression des gènes – VISION

L’organisation moléculaire joue un rôle important dans différents processus cellulaires. L’observation de cette organisation par microscopie de super-résolution en molécule unique reste un verrou technologique dans des milieux denses et compactes comme les noyaux cellulaires. La limitation principale est l'échelle de temps sur laquelle l'organisation moléculaire peut évoluer en 3D et qui ne convient pas à l'imagerie en super-résolution. Dans ce projet, nous proposons de développer une modalité de microscopie super-résolution innovante et unique. Notre approche est basée sur une excitation sélective combinée avec l’imagerie volumétrique par microscopie multifocale pour une imagerie efficace en 3D. En plus, les fonctionnalités cellulaires vont être arrêter réversiblement à basse température suffisamment de temps pour imager la distribution des molécules et leurs orientations sans artefacts liés aux mouvements. Le résultat sera une meilleure détermination discrimination des molécules adjacentes et de l’organisation moléculaire. Grace à cela, l’organisation de l’ADN et des histones autour des sites de transcriptions va être imager en super-résolution et suivis à des moments différents avec une résolution temporelle de quelques minutes.