Analyses structurales et fonctionnelles de deux moteurs moléculaires membranaires présents chez les bactéries à Gram-négatif. – BacMolMot

Le but ce projet est de déterminer la structure de deux complexes membranaires afin de mieux comprendre comment ils transmettent l’énergie à travers l’enveloppe bactérienne des organismes à Gram négatif. Les complexes Tol et Ton conduisent l’énergie de la membrane interne à la membrane externe afin d’assurer les fonctions essentielles à la survie des bactéries. Ces nano-machines forment des moteurs moléculaires qui transforment la force protomotrice en mouvements mécaniques. Les deux complexes de la membrane interne sont composés des sous unités TolQ, TolR et TolA pour le système Tol et ExbB, ExbD et TonB pour le système Ton. TolA et TonB traversent le périplasme et interagissent avec les protéines localisées dans la membrane externe, le système TolB-Pal, pour Tol, et les récepteurs tolB dépendants, pour Ton. Bien que les structures de Deux domaines solubles issus de ces complexes aient été résolues, aucune information structurale n’a été décrite à ce jour sur les protéines membranaires et leurs complexes.
Afin d’obtenir une vision intégrée des complexe Tol et Ton au niveau de la membrane interne, nous nous proposons de développer une étude pluri-disciplinaire alliant des techniques de génétique, de biochimie et de biophysique. Le but de ce projet est de mettre en place cinq grands axes afin de caractériser ces complexes : 1- L’étude des interactions in vivo entre les sous unités de ces complexes et la recherche d’autre(s) partenaire(s). 2-L’étude fonctionnelle des complexes purifiés après reconstitution dans des bicouches lipidiques planes. 3- L’analyse structurale des domaines solubles d’ExbB et TolQ (qui représente environ 40%). 4- L’ étude structurale et dynamique des complexes par RPE. 5- La détermination de la structure de ces complexes.