Reprogrammation de Cellules d'Oiseau en Cellules Souches Induites – AviRepro

Le domaine des cellules souches est actuellement en pleine révolution. Le phénomène de reprogrammation d?une cellule différenciée en cellule souche pluripotente induite (iPS) a été récemment démontré chez la souris et l?homme. Ce processus est obtenu par une simple combinaison de facteurs de transcription identifiés au préalable dans les cellules ES de souris. Ce processus de reprogrammation n'a été actuellement démontré que chez les mammifères. L?objectif de ce projet est de démontrer que le phénomène de reprogrammation peut également être obtenu dans d'autres espèces de vertébrés et chez le poulet en particulier. En effet, le poulet demeure un modèle largement utilisé pour la biologie du développement (Stern, 2005). De plus, les cellules souches embryonnaires de poulet (?cESC?) ont également été identifiés, isolés et caractérisés (Pain et al., 1996; Petitte et al., 2004). Nous avons également démontré que ces cellules pouvaient être génétiquement modifiées par différents vecteurs (Pain et al., 1999, brevet FR 01/15 111). Plus récemment, nous avons également montré que le caractère de pluripotence était maintenu par les deux gènes cPouV et cNanog, les homologues aviaires des gènes bien connus Oct4 et Nanog des mammifères. Nous avons identifié et cloné ces gènes dont l?existence même semblait jusqu?à présent restreinte aux seuls mammifères (Lavial et al;, 2007). Ainsi, ces gènes apparaissent être des acteurs clés de la physiologie des cellules cESC mais également des cellules germinales de poulet. La proposition vise à démontrer que les cellules somatiques de poulet peuvent être reprogrammées en iPS et que ces iPS se comportent de façon similaire aux cellules cESC à la fois par des études moléculaires et l?anlyse de leurs propriétés fonctionnelles in vitro et in vivo. Comme substrat pour la reprogrammation, nous nous concentrerons sur les fibroblastes mais également sur les monocytes, qui représentent une cellule somatique adulte facilement disponible et qui présentent une grande plasticité. Les principaux objectifs de la proposition sont : - d?identifier la meilleure combinaison de facteurs nécessaires à la reprogrammation de cellules aviaires, y compris les fibroblastes et les monocytes, en cellules iPS - de comparer ces cellules iPS avec les cellules cESC et ainsi d?établir une base de comparaison avec le système mammifère - d?identifier les différentes étapes nécessaires à ce processus à la fois au nvieau transcriptionnel et épigénétique. En conclusion, l'objectif ambitieux de ce projet est de comprendre comment une cellule somatique aviaire va acquérir un phénotype de cellule souche pluripotente par reprogrammation.