Interactions paracrines et endocrines dans le foie en régénération : impact de la signalisation calcique. – CaSiLiRe

Après amputation ou destruction partielle du tissu hépatique (pathologique ou expérimentale), le foie restant rétablit sa masse au cours d'une régénération dont les mécanismes restent incomplètement connus. Un réseau d'interactions directes et indirectes préside à la régulation des processus de régénération. Parmi les nombreux agonistes qui participent à ces interactions, certains impliquent la signalisation calcique. Notre objectif principal est de déterminer la place de la signalisation calcique dans le déclenchement et le déroulement de la régénération hépatique, au sein de ce vaste réseau d'interactions paracrines, autocrines, endocrines et nerveuses.//Les trois grands axes de notre projet sont : 1. Interférer in vivo avec la signalisation calcique avant hépatectomie puis analyser les conséquences de cette interférence sur la régénération du foie. Pour cela, nous transférerons dans le foie de rat un gène codant pour une protéine interférant avec la signalisation calcique. Le gène de la parvalbumine, protéine liant le calcium, fera l'objet de nos premiers travaux, utilisant des constructions adénovirales injectées par voie portale chez le rat. D'autres stratégies seront entreprises, notamment l'étude des souris KO pour le RIP3 de type 2. Dans le cadre de ce projet, nous collaborons avec le Laboratoire Optique et Biosciences (Equipe 2, E. Beaurepaire, Inserm U696, Ecole Polytechnique), dont l'expertise en matière d'imagerie fonctionnelle sur tissus nous permettra d'étudier en microscopie multiphotonique les signaux calciques dans le foie intact perfusé. 2. Etudier les interactions paracrines impliquant des agonistes mobilisant le calcium intracellulaire, mises en jeu pendant la régénération hépatique, en nous focalisant sur l'étude de l'ATP et des récepteurs purinergiques. Nous analyserons les types cellulaires et les mécanismes impliqués dans la libération d'ATP observée après hépatectomie partielle, la distribution des différents types de récepteurs purinergiques dans le foie, ainsi que l'impact fonctionnel de la signalisation purinergique sur la prolifération cellulaire et la sécrétion biliaire pendant la régénération hépatique. Ces travaux seront enrichis par l'étude de souris KO pour les récepteurs P2X7 ou P2X4, dont nous disposons par le biais de collaborations. 3. Analyser l'implication de la vasopressine et de la signalisation calcique chez des patients en situation d'hépatectomie majeure (donneurs familiaux pour transplantation hépatique, et receveurs). Ce travail sera réalisé en étroite collaboration avec le Centre Hépato-Biliaire de l'Hôpital Paul Brousse à Villejuif (Equipe 3, JC Duclos-Vallée).//Les résultats obtenus suggèrent que la signalisation calcique cytosolique contribue à l'entrée des hépatocytes dans le cycle cellulaire et à la restoration de la masse hépatique après hépatectomie partielle. La contribution du calcium intranucléaire est en cours d'étude et pourrait se révéler plus importante encore. La dynamique des signaux calciques au cours de la régénération du foie chez le rat, analysée à l'échelon tissulaire, pourrait révéler un profond remodelage des réponses aux agoniqtes, comme observé à l'échelon cellulaire. L'étude de souris KO pour les récepteurs P2X4 et P2X7 sera capitale pour analyser le rôle de ces récepteurs au cours de la régénération du foie, dans la libération d'ATP, dans la stimlulation autocrine et paracrine de l'entrée des hépatocytes dans le cycle cellulaire. Chez l'homme, l'analyse comparative des plasmas donneurs et receveurs au cours de la régénération du foie restant ou du greffon pourrait ouvrir des voies de régulation encore inexplorées.