GlycoIngenierie des protéines thérapeutiques: valiadtion d'un transfer d'acide sialique de type humain – Siamed

75% des protéines actuellement disponibles sont produites en système de mammifères car il est nécessaire qu'elles soient glycosylées pour exercer leur activité in vivo. Cependant, leur profil de glycosylation n'est pas humain mais c'est celui de la cellule animale qui les a produites. Ainsir, le degré et la nature de la sialylation sont différents, ce qui dans la plupart des blockbusters actuels, compromet les propriétés pharmacocinétiques (durée de vie), l'innocuité (immunogénicité) et pour finir l'efficacité (dose injectée) du biomédicament. Dans ce contexte, les BioIndustries sont en attente de nouvelles solutions pour optimiser leurs produits.
Le projet SiaMed répond à ces besoins en contrôler la glycosylation de clones cellulaires CHO équipés produisant des protéines thérapeutiques .Ce bioprocédé permet d'optimiser la sialylation de la protéine en la rendant proche de celle de l'homme.Cette innovation par un brevet européen doit être validée par une preuve de concept.
Le projet SiaMed entreprendra de remodeler deux familles de biomédicaments qui, à eux seuls, feront la moitié du marché biopharmaceutique d'ici 5 ans:les hormones glycoprotéiques (WP1), traitement privilégié de l'infertilité et les anticorps thérapeutiques (WP2), traitement récent des pathologies inflammatoires et tumorales. Dans les 2 familles, la sialylation des produits conditionnent leur activité.
Les travaux consisteront à :
1. cotransfecter la lignée CHO, seule lignée eucaryote approuvée pour les biomédicaments, à l'aide les plasmides codant pour la protéine d'intérêt et une série de sialyltransférases propriétaires. La glycosylation étant protéine- et site-spécifique, un criblage doit être établi pour identifier, pour chaque candidat, la meilleure enzyme de sialylation.
2. établir une stratégie de sélection/amplification pour produire des clones hyperproducteurs ayant le meilleur taux de sialylation par microscopie confocale quantitative (BioVays, Marseille). L'objectif est ici de pouvoir utiliser cette stratégie pour préparer des lignées humanisées adaptées à la bioproduction (GMP).
3. caractériser la glycosylation des candidats par spectrométrie de masse (Protéodynamics, Clermont-Ferrand). Optimiser la sialylation des protéines est jusqu'à présent difficile à réaliser mais nécessaire pour assurer une durée de vie convenable aux biomédicaments..
Obtenir à l'issu du projet un procédé de sialylation reproduisant la glycosylation humaine majoritaire sera totalement novateur. La recherche de partenaires souhaitant valoriser ces produits et/ou la méthodologie SiaMed sera tout au long du contrat assurée par le cabinet Eurobiobiz (Clermont-Ferrand) et le Service de Valorisation de l'Université sur la base d'une récente étude économique qui a sélectionné une trentaine de produits et une vingtaine d'entreprises.