– KiPancreas

L'implication du facteur de transcription vHNF1/ HNF1beta/ Tcf2 dans l'organogenèse précoce est clairement soulignée par l'identification chez l'homme des mutations de ce gène à l'état hétérozygote qui sont à l'origine des défauts dans l'organogenèse du rein et du tractus génital, des hypoplasies pancréatiques sévères ainsi qu'un diabète de type 2 à apparition précoce (Maturity Onset Diabetes of the Young, MODY5). Actuellement, plus de 70 mutations ont été identifiées et l'incidence de cette maladie semble plus fréquente que prévu. Bien que le diabète soit fréquemment retrouvé, ces mutations sont systématiquement associées à des anomalies du développement rénal (reins dysplasiques, hypoplasiques et kystiques), entraînant une insuffisance rénale terminale. Cette association du diabète et d'une maladie rénale cystique est connue comme syndrome “Renal Cysts And Diabetes“ (RCAD). De plus, l'observation d'une perte bi-allèlique de HNF1beta dans des cancers de reins à cellules chromophobes ainsi que l'inactivation epigénétique de HNF1beta dans des cancers d'ovaire, suggère que HNF1beta agirait comme un gène suppresseur de tumeurs. Les mécanismes moléculaires qui rendent compte de ce large spectre de symptômes restent essentiellement inconnus. En effet, les souris mutantes hétérozygotes pour un allèle nul n'ont pas de phénotype tandis que la délétion à l'état homozygote résulte en une létalité embryonnaire précoce, due à une différenciation anormale de l'endoderme viscéral extra-embryonnaire. La complémentation avec des annexes extra-embyonnaires sauvages par agrégation tétraploïde surmonte cette létalité et permet la génération des embryons déficients pour HNF1beta. Nous avons ainsi montré que HNF1beta a un rôle crucial dans la mise en place du pancréas et dans la régionalisation de l'intestin primitif. Les souris mutantes présentent aussi une hypoplasie hépatique sévère et des anomalies du branchement du bourgeon urétéral (études en cours). En plus de ce rôle crucial précoce, l'invalidation spécifique dans le foie indique un rôle plus tardif de HNF1beta dans la morphogenèse des canaux biliaires intra-hépatiques. Enfin, il a été récemment montré que l'invalidation conditionnelle dans le rein conduit au développement de reins multikystiques accompagnée d'une diminution accrue de l'expression des gènes Pkhd1, Pkd2 et Umod, dont les mutations sont responsables de syndromes kystiques rénaux chez l'homme. La caractérisation récente au laboratoire de deux nouvelles mutations chez deux fœtus de 27 et 31 semaines présentant des reins dysplasiques polykystiques, des anomalies du tractus génital et une hypoplasie pancréatique sévère, indique que les mécanismes de genèse de kystes rénaux semblent différents de ceux décrits chez les souris invalidées pour HNF1beta dans le rein, soulignant le besoin de générer des autres modèles. En effet, aucune des souris modèles disponibles n'a jusqu'à présent reproduit précisément les conditions du syndrome RCAD. Nous générons des séries allèliques de sévérité variable du gène HNF1beta chez la souris par introduction des mutations ponctuelles identifiées chez l'homme. Très utilisée chez les invertébrés, cette stratégie basée sur l'isolement des allèles présentant une activité biologique réduite va permettre d'identifier d'autres fonctions de ce gène qui ne peuvent êtres examinés par la génération des allèles nuls. La création de ces lignées ainsi que le KO conditionnel est en cours de réalisation (Clinique de la Souris). Objectifs : - Une meilleure compréhension de la pathogénicité associée au syndrome RCAD - Développer des stratégies thérapeutiques afin de prévenir des maladies débilitantes comme la polykystose rénale (aucun traitement efficace n'est aujourd'hui disponible). - Implication d'une perte somatique de HNF1beta dans le développement de certains cancers par l'analyse de lignées de souris portant un allèle hypomorphe et un allèle nul inductible - Identifier des gènes modificateurs qui pourraient atténuer, voire supprimer un phénotype donné. - Identifier d'autres gènes impliqués dans des réseaux de régulation contrôlant l'organogenèse chez les vertébrés.