Dynamique des "signalosomes" de récepteurs dans la perspective de nouveaux traitements des maladies psychiatriques – PSYGNALOSOME

Les maladies psychiatriques concernent près de 20% de la population. Cependant, les traitements actuels souffrent de nombreuses limitations. Il est donc indispensable de développer de nouveaux traitements plus efficaces, et sans effets secondaires (tels que dépendance et accoutumance). Les récepteurs couplés aux protéines G (RCPG) constituent une cible majeure pour le développement de nouveaux médicaments dans le domaine psychiatrique. En effet, la plupart des médicaments actuels ciblent ces récepteurs, directement ou indirectement. D'autre part, la majorité des cibles récemment identifiées sont des RCPG, comme des récepteurs métabotropiques du glutamate (mGlu2 & mGlu5), le récepteur GABAB, des récepteurs de la sérotonine (5HT2 & 4) et de la vasopressine (V1b).
Il est reconnu que les RCPG interagissent avec de nombreuses protéines qui contrôlent leur trafic (vers et de la membrane plasmique), leur localisation et leurs propriétés de signalisation. Ceci ouvre de nouvelles perspectives pour le développement de molécules ayant une action plus précise et qui n'affecteront que les propriétés d'un récepteur qui ont un intérêt thérapeutique. Ainsi, de telles molécules devraient avoir beaucoup moins d'effets secondaires.
Nos objectifs sont donc 1) d'identifier l'ensemble des partenaires associés aux récepteurs sus-mentionnés, 2) d'étudier la dynamique de l'interaction de ces partenaires avec leur récepteurs dans des cellules vivantes, 3) d'identifier les rôles fonctionnels de chacun de ces partenaires, et enfin 4) de mettre en place les moyens techniques nécessaires à l'étude de ces interactions in vivo.
Pour cela, nous utiliserons différentes techniques de fishing et une analyse protéomique, en partant soit de motifs identifiés (site de liaison de domaines PDZ ou SH3 par exemple), soit directement de protéines entières purifiées. L'interaction des partenaires identifiés avec leur cible et sa dynamique seront étudiées dans des cellules vivantes par des techniques de transfert d'énergie (RET). Les conséquences fonctionnelles de ces interactions seront étudiées en visualisant la localisation des récepteurs étudiés dans des neurones, en mesurant l'efficacité de couplage des récepteurs à diverses voies de transduction en utilisant des méthodes électrophysiologiques, biochimiques et pharmacologiques. Pour les partenaires identifiés qui semblent avoir les propriétés les plus intéressantes, différentes conditions permettant d'affecter la formation du complexe in vivo seront testées. Celles ci seront basées sur l'utilisation de peptides TAT ou de virus exprimant soit une partie des protéines impliquées, soit des RNAi.
Pour atteindre ces objectifs, 4 équipes travailleront de concert, chacune étant responsable d'un groupe de récepteurs (mGlu, GABAB, 5HT ou V1), et chacune étant responsable d'un aspect technique du projet (analyse protéomique, technologies de RET et de pharmacologie, électrophysiologie et expérience in vivo, production de récepteurs purifiés).