Thérapie génique de déficits immunitaires combinés sévères liés aux déficits en gamma-c, RAG1 et Artemis – SCID Therapie Génique

Les déficits immunitaires combinés sévères (DICS) représentent un groupe hétérogène de maladies dont le dénominateur commun est l’absence de lymphocytes T. Parmi les onze formes différentes de DICS décrites, les déficits en chaîne ? commune (DICS-X1) en RAG1 et Artemis sont les formes plus fréquemment observées. L’absence des lymphocytes T est associée à un défaut fonctionnel ou de différentiation des lymphocytes B. La greffe des cellules souches hématopoietiques est la seule option thérapeutique et les résultats cliniques sont partiellement satisfaisants quand elle est réalisée à partir d’un donneur incompatible familiale. Ces résultats peu satisfaisants justifient le développement des traitements alternatifs. Un protocole de thérapie génique a été mis au point et appliqué au traitement du DICS-X1 à partir de Mars 1999 à l’Hôpital Necker avec un effet clinique soutenu depuis plus de 6 ans. Néanmoins, trois évènements indésirables graves se sont développés chez trois patients inclus dans ce protocole. Ces trois évènements sont à relier à l’intégration du provirus à côté de l’oncogène LMO-2 capable d’induire l’hyperexpression de cette protéine par l’effet enhanceur en cis du LTR viral (Long Terminal Repeat). Dans le but de réduire ou prévenir ces évènements indésirables graves nous envisageons de tester l’efficacité biologique et la toxicité potentielle d’un vecteur lentiviral avec un LTR muté exprimant le cDNA de chacun des 3 gènes thérapeutiques : ?c, RAG1, Artemis. Dans ce vecteur lentiviral dérivé d’HIV, l’expression du gène thérapeutique est sous le contrôle transcriptionnel d’un promoteur interne (EF1a) sans séquences enhancers. La région U3 du LTR a été totalement deletée de séquences promoteurs et enhancers. Cette nouvelle génération des vecteurs devrait pouvoir empêcher l’effet enhancer de proximité observé dans le précédent essai clinique. Compte tenu de la moindre efficacité du promoteur EF1a dans les cellules murines, ce promoteur sera substitué par le promoteur PGK dans les modèles rongeurs utilisés. Les autres évènements de mutagenèse insertionnel tel que la mutation d’un gène par insertion intragènique sont très rarement rapportés dans la littérature. Leur efficacité biologique et toxicité potentielles sont attentivement évaluées in vitro et dans des modèles murins. Trois modèles transgèniques cliniquement relevants ont été générés et seront utilisése. Les retombées de ce projet seront constituées par le développement de 3 protocoles cliniques pour ces trois formes de DICS : ?c, RAG1 et Artemis.