– MIRNA

Les microARNs (miRNAs) sont de courts RNA double brins (20-25 nt) qui jouent un rôle essentiel dans le développement chez les organismes inférieurs (C elegans, Drosophila etc.). An niveau moléculaire, la plupart des miRNAs inhibent specifiquement l'expression de gènes cibles, soit en induisant la dégradation du RNA messager, soit en bloquant sa traduction. An niveau cellulaire, les miRNAS influencent la balance entre prolifération, différenciation et mort cellulaire. Environ 200 miRNAs ont été caractérisés à ce jour chez les mammifères, mais leur fonction est encore très mal connue. Le but de notre projet est 1. d'établir les profils d'expression des miRNAs dans plusieurs modèles importants de différenciation chez les mammifères, une différenciation de type endodermique (foie) , une différenciation de type mésodermique (muscle) et une différenciation de type ectodermique (système nerveux). Nous utiliserons pour cela des puces oligonucléotides, et la technique du Northern blot pour confirmer les hits, et nous tirerons partie d'une part de modèles cellulaires uniques dont nous disposons et, d'autre part, de notre collaboration avec la compagnie Exiqon, avec laquelle nous mettons au point une approche particulièrement prometteuse pour ce type d'analyse. 1. d'analyser au niveau fonctionnel les miRNAs exprimés, en utilisant l'approche que nous avons mis au point et qui utilise des oligonucléotides antisens modifiés ou, lorsque cette approche est impossible, en utilisant des siRNAs contre le précurseur. 1. d'analyser le mécanisme d'action des miRNAs, en caractérisant les gènes cibles, soit par une approche « gène candidat » basée sur les prédictions in silico publiées, soit par une approche biochimique globale. Ces études non seulement devraient améliorer les connaissances sur le processus de différenciation cellulaire chez les mammifères, mais encore ont des applications potentielles dans le domaine des cellules souches/précurseurs et de leur utilisation en thérapie cellulaire.