Contrôle par FLT3 des réseaux inhibiteurs de la douleur dans la douleur neuropathique périphérique – COPINFLT3

La douleur neuropathique périphérique (PNP) est un problème de santé publique dont le coût sociétal est élevé. La PNP est une douleur causée par une atteinte du système nerveux somatosensoriel. Pour améliorer sa prise en charge, il est nécessaire de mieux identifier les mécanismes qui contrôlent la transition de la douleur aiguë à la douleur chronique. Cette transition résulte d’un déséquilibre favorisant les systèmes sensoriels excitateurs (sensibilisation) au détriment des inhibiteurs. Le système opioïdergique endogène inhibiteur joue un rôle clé dans l'adaptation à la douleur après une lésion. Un défaut d’engagement de tels systèmes inhibiteurs endogènes, associée à une sensibilisation persistante à la douleur, seraient probablement des facteurs fondamentaux qui contribueraient à l'initiation et au maintien de la PNP. Nous avons démontré le rôle clé du récepteur neuronal Fms-like tyrosine kinase 3 (FLT3) dans les PNP. De manière intéressante, des données récemment obtenues dans notre laboratoire indiquent que FLT3 favorise l'hypersensibilité à la douleur persistante via une interaction avec le système opioïdergique endogène, en particulier via l'inhibition spécifique de l'activité du récepteur opioïde delta (DOR) dans la PNP. A noter qu’une telle interaction fonctionnelle n'existe pas dans la douleur inflammatoire chronique (DIC). Sur la base de ces observations, notre hypothèse est que FLT3 inhibe l'activité du DOR, impliquée dans la récupération après une lésion nerveuse, responsable du maintien de la PNP. Dans ce but, nous avons développé un consortium composé de partenaires de renommée internationale maîtrisant des techniques de pointe et ayant une expertise complémentaire dans le domaine de la douleur, notamment des techniques biochimiques/de développement de médicaments et de comportement, d'électrophysiologie des neurones sensoriels et des neurones spinaux de la corne dorsale. Les expériences seront réalisées chez des souris mâles et femelles afin d’identifier un possible dimorphisme sexuel concernant les mécanismes de récupération post PNP. Tout d’abord, nous étudierons le rôle de FLT3 et DOR dans la chronicisation de la douleur à l’aide de modèles murins transgéniques présentant une délétion conditionnelle de Flt3 ou Oprd1 (DOR) dans les neurones sensoriels. Nous identifierons les sous-populations neuronales exprimant FLT3 et DOR dans les ganglions de la racine dorsale (DRG) en conditions basales et après PNP, en les comparant à un modèle DIC pour évaluer la spécificité des interactions. À l’échelle moléculaire, nous analyserons l’implication de FLT3 dans les voies de signalisation dépendantes de DOR. Ensuite, nous analyserons les interactions fonctionnelles entre DOR et FLT3 par imagerie calcique et patch-clamp en configuration whole-cell, dans un système d’expression hétérologue et des neurones sensoriels. Ces approches détermineront comment FLT3 régule DOR et son impact sur des canaux ioniques cibles, notamment les canaux potassiques (K2P). De plus, une analyse de l’ARNm des neurones exprimant FLT3 et DOR, via l’approche ribotag, sera réalisée en conditions naïve, DIC et PNP pour identifier les mécanismes moléculaires spécifiques. Enfin, nous caractériserons histologiquement et fonctionnellement les neurones spinaux contrôlés par les neurones sensoriels FLT3 et/ou DOR. Pour cela une cartographie des projections des fibres afférentes FLT3 et/ou DOR sera réalisée par marquage transsynaptique dans les modèles PNP et DIC. L'effet de FLT3 sur le contrôle présynaptique des afférences primaires médié par DOR sera analysé par des enregistrements électrophysiologiques ex vivo. Ainsi, le projet COPINFLT3 apportera de nouvelles connaissances sur le rôle de FLT3 dans la PNP et sa régulation de l’activité constitutive de DOR. Ces résultats pourraient ouvrir des perspectives thérapeutiques en optimisant l’inhibition endogène de la douleur via DOR et en affinant les stratégies de sélection des inhibiteurs de FLT3.