Le rôle des vesicules extracellulaire dans le neuropaludisme et l'anémie palustresévère – EVREST

Les décès liés au paludisme sont en majorité causés par ses formes sévères, notamment le paludisme cérébral (CM) et l'anémie palustre sévère (SMA), qui peuvent entraîner des séquelles neurocognitives à long terme. Bien que les causes exactes du CM et de la SMA ne soient pas totalement élucidées, elles semblent provenir d'un dysfonctionnement du système de l'hôte face à l'infection parasitaire. Le CM se caractérise par la rupture de la barrière hémato-encéphalique (BHE), entraînant une perméabilité vasculaire, tandis que la SMA se distingue par la destruction massive des globules rouges (GR) sains et parasités, une érythropoïèse inefficace et une production anormale des GR. Des études suggèrent que les vésicules extracellulaires (EVs), issues de diverses cellules comme les GR, les cellules gliales et endothéliales, pourraient jouer un rôle dans la pathogenèse du CM et de la SMA en en transportant des molécules actives capables d’altérer les processus biologiques des cellules réceptrices. Nos résultats récents révèlent que le protéome et le miRNome des VEs plasmatiques de patients présentent des différences significatives en fonction des manifestations cliniques de la maladie. Ces observations soulignent la nécessité de réaliser des études plus approfondies sur le rôle des VEs, notamment leurs propriétés, leur contenu et leurs fonctions au cours du CM et de SMA.
Dans ce projet, nous proposons une approche intégrative combinant la biologie moléculaire et cellulaire afin de caractériser les vésicules extracellulaires (EVs) issues de différentes formes cliniques du paludisme. Nous examinerons leur contenu moléculaire, notamment le protéome et le miRNome, et évaluerons leurs effets sur les cellules endothéliales et érythroïdes.
Plus spécifiquement, nous allons :
1) Déterminer l'origine cellulaire des EVs dans chaque groupe clinique à l’aide de la cytométrie en flux NanoFCM, en utilisant des anticorps spécifiques de types plusieurs types cellulaires. Des analyses comparatives du protéome et du miRNome permettront d’identifier les protéines et miARN différentiellement exprimés et impliqués dans la physiopathologie du CM et du SMA.
2) Caractériser le mécanisme par lequel les EVs dérivées des patients atteints de CM modifient les cellules endothéliales cérébrales ((hCMEC/D3), en utilisant des essais fonctionnels et des analyses transcriptomiques. Nous identifierons les facteurs des EVs responsables du dysfonctionnement endothélial cérébral grâce à des expériences de gain et de perte de fonction.
3) Caractériser l’impact des EVs issues des différents groupes cliniques sur la différenciation des érythroblastes. Des essais fonctionnels seront également réalisés afin de déterminer si et comment les EVs modifient les propriétés de la membrane des érythrocytes.
Les résultats de ce projet amélioreront notre compréhension de la physiopathologie du CM et de l’SMA et ouvriront la voie à de nouvelles stratégies thérapeutiques.