Bases moléculaires et structurales pour la terminaison de l'assemblage du système de sécrétion de type VI – Co-6TER

Les systèmes de sécrétion de type VI (T6SS) sont des nanomachines contractiles bactériennes utilisant un mécanisme à ressort pour transporter de effecteurs dans les cellules cibles, et participent ainsi à la compétition et à la pathogenèse. Cet appareil est constitué d’une structure tubulaire, le complexe tube-fourreau (CTF), comprenant un tube interne entouré d’un fourreau contractile. Cette structure est maintenue sous forme étendue, et la contraction du fourreau permet l’éjection du tube dans la cellule cible. La biogenèse du T6SS comprend l’assemblage du complexe membranaire, le recrutement de la plateforme (PF) et la polymérisation des sous unités du tube et du fourreau formant le CTF. Si les mécanismes moléculaires sous-jacents à ce phénomène sont encore mal définis, la polymérisation du CTF est coordonnée par la protéine TssA. Cette protéine forme un dodécamère qui se fixe sur la PF puis recrute les différentes sous unités du tube et du fourreau. Durant l’élongation du CTF, TssA reste attachée à l’extrémité distale du CTF jusqu’à atteindre la membrane opposée ou elle interagit avec la protéine TagA. TagA agit comme une ‘gâchette’ en arrêtant l’assemblage du CTF et en maintenant le fourreau sous sa forme étendue. Comment TagA s’attache à TssA et contrôle son activité est inconnu. Les travaux réalisés par ce consortium ont permis de i) déterminer les structures cristallographiques de deux domaines de TagA, ii) d’identifier des domaines d’interaction de TagA et TssA, et iii) de mettre en place de nouvelles méthodes biophysiques permettant l’étude de la dynamique moléculaire de ces protéines. Dans ce projet, nous souhaitons utiliser des approches de biochimie, biologie structurale, microbiologie et biophysiques et microscopie de fluorescence pour étudier les déterminants moléculaires et structuraux de l’interaction TssA-TagA in vitro et in vivo et ainsi mieux comprendre les mécanismes tardifs qui gouvernent l’arrêt de la polymérisation du T6SS.