Modification non virale du génome pour combattre des dystrophies rétiniennes – PolyCas9_RD

L'édition du génome par CRISPR-Cas9 s'est révélée très prometteuse pour le traitement des dystrophies rétiniennes (RD). Actuellement, les virus adéno-associés sont les vecteurs les plus utilisés pour les thérapies géniques rétiniennes, mais leur capacité d’encapsidation limitée et l’expression persistente du transgène les rendent sous-optimaux pour la délivrance de CRISPR-Cas9. La délivrance transitoire de la protéine Cas9 et de son ARN guide sous forme de complexes ribonucléoprotéiques (RNP) a été rapportée dans l'épithélium pigmentaire rétinien (EPR) et dans les cellules de l'oreille interne in vivo. Les membres de notre consortium ont étudié la délivrance transitoire de l'ARNm Cas9 ou du RNP dans l'EPR et les photorécepteurs, car ce sont les cellules cibles des dégénérescences rétiniennes héréditaires les plus répandues. L'ARNm Cas9 complexé avec différents vecteurs lipidiques ou peptidiques conduit à des mutations sur la séquence ciblée in vivo et principalement dans l'EPR. Des modifications majeures du système de délivrance sont nécessaires pour augmenter l'efficacité des modifications génétiques, et enfin, la sécurité et le coût de l'approche thérapeutique doivent être pris en compte lors de la conception de tels systèmes de vecteurs. Nos objectifs dans ce projet, sont de relever certains de ces défis grâce au développement d'un nouveau vecteur non viral à base de polymère pour la délivrance ciblée in vivo de complexes ribonucléoprotéiques RNP basés sur CRISPR/Cas9 ; et d'évaluer l'efficacité et la sécurité de notre nouvelle approche de délivrance dans un modèle murin de dystrophie rétinienne.