Vers une caractérisation exhaustive de la coordination de l'extrusion epithéliales par les caspases – CoECECa

Le rôle de barrière des épithéliums est constamment mis à l’épreuve par les nombreuses mitoses et apoptoses requises pour leur renouvellement. Ainsi, les épithéliums peuvent résister à de forts taux de mort cellulaire grâce à l’extrusion, une succession de remodelages des cellules apoptotiques qui permet leur expulsion sans impacter l’imperméabilité du tissu. A ce jour, l’étude de l’extrusion s’est principalement focalisée sur la contribution de l’actomyosine et de la E-cadhérine. Néanmoins nous ne savons que très peu de choses sur la contribution d’autres facteurs cellulaires. Enfin, le lien entre caspases et extrusion reste à ce jour très peu étudié. Ceci inclut l’absence de caractérisation exhaustive des substrats des caspases dans les épithéliums et leur contribution à l’extrusion. Le notum de la pupe de Drosophile, un épithélium monocouche, est un système idéal pour caractériser l’orchestration des extrusions par les caspases puisque qu’un grand nombre de cellules sont expulsées du notum par des extrusions médiées par les caspases effectrices. Nous proposons ici de combiner des méthodes innovantes de protéomique (N-ter labelling et spectrométrie de masse) couplées à la génétique de la Drosophile pour obtenir la première liste exhaustive de cibles des caspases effectrices clivées dans un épithélium in vivo. En utilisant la microcopie quantitative et semi-automatique couplée à de l’optogénétique, nous criblerons les substrats ayant un impact sur l’extrusion en aval des caspases effectrices dans le notum. Enfin, nous caractériserons leur dynamique par imagerie vivante et quantitative et nous étudierons l’impact des mutations conditionnelles des sites de clivage sur l’extrusion, la stabilité et la robustesse de l’épithélium. Cette étude générera la première phénoménologie quantitative de l’orchestration de l’extrusion cellulaire par les caspases et apportera des connaissances essentielles à la morphogenèse épithéliale et la régulation de leur stabilité.