Dévoiler l'impact de l'ADN centromérique dans la formation, l'intégrité et la fonction du centromère – CENtegrity

Préserver la fonction du centromère/son intégrité est un défi crucial pour les cellules afin de maintenir un caryotype correct suite à la division cellulaire. En effet, des anomalies dans la formation ou la fonction du centromère conduisent à des altérations chromosomiques numériques (aneuploïdie) et structurelles, ces dernières étant souvent retrouvées dans les régions centromériques. Ces altérations sont des caractéristiques communes des cellules cancéreuses et des troubles du développement. Le centromère est une structure complexe constituée d’ADN et de protéines qui relie les chromosomes aux microtubules du fuseau mitotique. Dans la plupart des espèces, les centromères contiennent une chromatine spécifique riche en CENP-A, un variant de l’histone H3, et en ADN répétitif, appelé ADN satellite chez l’Homme, lié par CENP-B. Malgré de récents progrès dans l'identification des processus épigénétiques requis pour la spécification du centromère dépendant de CENP-A, le rôle de l'ADN répétitif et de CENP-B dans la structure, la formation et la fonction du centromère demeure peu connu. Les objectifs de ce projet sont de fournir de nouvelles connaissances sur le maintien de la position du centromère et de son intégrité ainsi que de déterminer le rôle et l’architecture de l'ADN centromérique répétitif. Mon équipe combinera notre technique d'édition du génome récemment développée qui permet d’atteindre une dégradation rapide des protéines avec une microscopie de pointe et des analyses de haut débit pour évaluer comment l'ADN centromérique / CENP-B contrecarrent l'aneuploïdie de chromosomes entiers. Nous allons décomposer les mécanismes moléculaires nécessaires à la spécification des centromères de novo en temps réel en combinant des approches de microscopie, de protéomique et de génomique après avoir éliminé la marque épigénétique du centromère CENP-A. Enfin, nous allons déterminer comment la manipulation génétique ou physique de l'architecture du centromère peut affecter l'intégrité chromosomique des approches à l’échelle de la molécule unique. Ce projet apportera une connaissance cruciale du rôle de l'ADN centromérique et de sa protéine associée dans la biologie du centromère et des chromosomes qui est fondamentale pour comprendre la genèse de l'instabilité chromosomique.