Contribution des ILC et des cellules T CD8 à la stéatose hépatique non alcoolique et à sa progression vers l’hépatocarcinome. – NASHILCCD8

CONTEXTE. La stéatose hépatique non alcoolique (NAFLD) est la maladie hépatique chronique la plus fréquente dans les pays industrialisés. Elle représente un continuum comprenant divers stades depuis la stéatose jusqu’à la stéatohépatite non alcoolique (NASH), caractérisée par une inflammation lobulaire, des cellules ballonisées, avec ou sans fibrose. Certaines NASH progresseront vers un carcinome hépatocellulaire (HCC). Le foie est un organe immune contenant de nombreuses cellules de l’immunité innée et adaptative. Un déséquilibre entre réponses pro- et antiinflammatoires, impliquant des mécanismes innés et adaptatifs, affecte l’induction de la progression de la NASH. Les cellules lymphoïdes innées de Type 1 (ILC1) et les NK sont les populations lymphocytaires innées hépatiques les plus abondantes. Elles détectent rapidement des altérations de l’homéostasie hépatique. Les ILC1 sont résidentes du foie et présentent une capacité cytotoxique directe par l’expression Granzyme B et indirecte par la production d’IFN?. Des études récentes suggèrent un rôle des ILC dans les maladies hépatiques immunitaires.
HYPOTHESE. Nous pensons que les populations d’ILC participent aux processus inflammatoires délétères par des altérations résultant de la dysrégulation de l’axe entéro-hépatique.
RESULTATS PRELIMINAIRES. En utilisant un régime MCD mimant la stéatose et un nouveau régime inducteur de NASH que nous avons validé, nous avons montré des altérations précoces des ILC1 et des NK entériques et hépatiques avec une altération de la production d’IFN? et une augmentation de la perméabilité intestinale et une altération plus tardive des lymphocytes T CD8. Dans une étude clinique, nous avons montré que les NK, cDC2 et les CD8 circulantes exprimant la perforine ou l’IFN? et les CD8 cytotoxiques hépatiques corrélaient avec l’inflammation et la ballonisation. De plus, des gènes hépatiques associés à la cytotoxicité, la présentation antigénique via le MHC-II pour les CD8 et à des cytokines inflammatoires pour les NK sont fortement corrélés.
BUT. Nous déterminerons la contribution des ILC, via l’IFN?, aux différents stades du développement de la stéatose, NASH et HCC et leurs interactions avec les CD8 et les cellules de Kupffer.
PLAN de TRAVAIL & METHODES. Nous déterminerons si:
-Les ILC1 contribuent directement au NASH. A l’aide de nouvelles souris pour une déplétion inductible de toutes les cellules productrices d’IFN? ou des NK/ILC1, nous supprimerons ces cellules à différents stades du régime NASH et évaluerons les paramètres immunologiques et métaboliques de la pathologie. Nous évaluerons la NASH dans des souris déficientes en IFN? ou pour son récepteur.
-Les ILC contribuent indirectement au NASH par la modulation des fonctions intestinales. En utilisant une nouvelle lignée pour le suivi de la destinée cellulaire des ILC3, nous suivrons a) leur différenciation in situ à partir de précurseurs, b) leur localisation intestinale, c) leur plasticité vers les ILC1.
-Les ILC1 interagissent avec les CD8 et/ou les cellules de Kupffer (KC). Nous purifierons les ILC circulantes, hépatiques, intestinales ou du tissus adipeux de souris nourries par un régime NASH et réaliserons une analyse par RNAseq sur cellules uniques. La contribution des molécules et voies hépatiques dysrégulées à un dialogue avec les CD8 et les KC sera analysée.
-L’impact des composants spécifiques du régime inducteur de NASH sur les populations immunes et leur métabolisme intracellulaire. Nous reproduirons les effets du régime NASH in vitro pour élucider l’impact des composés stéatogènes individuels sur les fonctions ILC et les CD8. Celles-ci seront purifiées puis cultivées en présence de palmitate, de concentrations élevées de glucose ou de cholestérol et leur phénotype et leur fonction seront évaluées.
IMPACT. Nous établirons une base rationnelle pour de nouvelles thérapies ciblant ces populations innées pour prévenir la progression de la NAFLD vers la fibrose et HCC irréversibles.