Rôle respectif des cellules de l'immunioté innée en réponse à des agents de l'environnement inhibiteurs de la réaction asthmatique – RESOLUTION-ASTHME

Contexte Les PRR (Pattern Recognition Receptor) comme les récepteurs Toll-like (TLR) et les lectines de type C (comme DC-SIGN, Dendritic Cell-Specific Intercellular adhesion molecule 3-Grabbing Nonintegrin), reconnaissent des motifs moléculaires associés aux pathogènes (PAMP) et jouent un rôle central dans la réponse précoce de l’hôte aux infections microbiennes. Les PAMP activent 3 types cellulaires participant au système d’immunosurveillance innée du poumon : (1) les cellules dendritiques, cellules présentatrices d’antigène induisant la polarisation et l’activation de la réponse lymphocytaire T, (2) les cellules épithéliales pulmonaires capables d’induire le recrutement, la différenciation et l’activation des cellules dendritiques, et (3) les cellules Natural Killer (NK) qui régulent le développement de la réponse immune adaptative notamment par leur interaction avec les DC. Ces cellules de l’immunité innée participent par ailleurs au développement de la réaction asthmatique. Hypothèse La réponse Th2 responsable de l’asthme pourrait être régulée par l’action combinée de ces cellules après activation par des PAMP de l’environnement, entraînant ainsi une résolution de la réaction asthmatique allergique. Projet 1- Identification d’un PAMP induisant la résolution de la réaction allergique pulmonaire Dans un modèle de sensibilisation à l’acarien de la poussière de maison Dermatophagoides pteronyssinus (Dpt), l’effet de certains PAMP sur la réaction allergique pulmonaire sera évalué. Les PAMP Pam3CSK4 (ligand du TLR2 / TLR1), MALP-2 (ligand du TLR2 / TLR6) et poly(I :C) (ligand du TLR3) seront administrés par voie intratrachéale seuls ou en conjonction avec le ManLAM (ligand du DC-SIGN). Ces expériences aboutiront à l’identification d’un PAMP ou d’une association de PAMP capable d’inhiber la réaction allergique pulmonaire. 2- Implication des cellules dendritiques, des cellules épithéliales bronchiques et des cellules NK dans l’inhibition de la réaction allergique pulmonaire par le/les PAMP choisis Le rôle des cellules dendritiques (plasmacytoïdes : pDC, en comparaison avec les myéloïdes : mDC) et les cellules NK sera appréhendé par l’injection de ces cellules préalablement activées avec le PAMP choisi à des souris sensibilisées, ou par déplétion de ces populations cellulaires. L’implication des cellules épithéliales bronchiques sera évaluée grâce à des souris chimères sensibilisées : souris déficientes en TLR reconnaissant le PAMP choisi, irradiées et reconstituées avec des cellules de moelle osseuse de souris de type sauvage. Ces souris possèdent ainsi des cellules épithéliales déficientes avec un système immunitaire compétant non déficient. 3- Dialogue in vitro des cellules épithéliales bronchiques, des cellules dendritiques et des cellules NK en réponse au PAMP ou l’association de PAMP choisi Les fonctions de chaque type cellulaire après culture simple ou coculture en transwell® sur épithélium polarisé seront analysées en réponse au PAMP choisi. Conclusion Ce travail permettra d’identifier les mécanismes impliqués dans la résolution de la réaction pulmonaire allergique induite par un agent microbien issu de l’environnement, ouvrant ainsi de nouvelles perspectives dans le contrôle de la réaction allergique.