Production en système transitoire de protéines recombinantes d’intérêt, application à la production d’un candidat vaccinal anti-Leishmania – Vaccin Anti-Leishmania

Le système actuel de production de protéines recombinantes dans les plantes fait appel à la transformation constitutive. Le délai d’obtention pour régénérer et analyser les plantes est long (voir annexe1) et si le produit espéré ne donne pas satisfaction en termes de rendement, d’activité biologique, coût d’extraction etc, la production de la protéine est alors abandonnée, mais 2 à 3 ans après. Enfin, il est maintenant bien établi que le niveau de production dans les plantes dépend de la protéine étudiée, du type de tissus, du promoteur, de l’environnement etc… Dans le système constitutif, cette étape d’optimisation n’est pas possible car trop longue et trop coûteuse. Le système de transformation transitoire proposé permet de faire le choix des protéines qui vont aller en expression constitutive. Ce système permet donc de tester rapidement plusieurs protéines et de rejeter dans un délai très court (1 mois) celles qui ne sont pas intéressantes pour la production dans les plantes (annexes 1 et 2). Cette étape est possible que si on arrive à produire suffisamment de protéines recombinantes en transitoire pour faire les essais. Notre projet utilise les capacités du virus de la panachure jaune, notamment sa capacité élevée de réplication (0,5 à 1 mg de virus par g de riz) et ses suppresseurs de « silencing » pour exprimer à un haut niveau des protéines recombinantes. Ainsi nous proposons un système d’amplification transitoire, l’IRDAMT, qui utilise un amplicon viral (partie réplicative du virus) et des suppresseurs de « silencing ». Ce système permet de sélectionner un nombre important de protéines dans le système plante, de valider rapidement l’activité biologique, voire d’optimiser l’activité de la protéine, d’optimiser la production en testant différents promoteurs, tissus, localisation sub-cellulaire etc (annexes 1 et 3). Les protéines sélectionnées comme potentiellement intéressantes pourront ensuite aller en phase pilote avec le système d’amplification constitutive, l’IRDAMC, système qui utilise l’amplicon et les suppresseurs utilisés dans le système IRDAMT et qui permet d’avoir un haut niveau de production. Notre projet met aussi en avant une application pour la production d’un candidat vaccinal contre la Leishmania, maladie importante qui frappe les pays du sud. Grâce aux collaborations avec nos partenaires africains, nous avons pu, en exploitant la diversité du virus de la panachure jaune du riz, identifier des protéines virales à très fort potentiel pour supprimer le « silencing ». Ce projet en collaboration avec des équipes du SUD, est en droite ligne avec les priorités de l’IRD.