Syndrome de Netherton : un modèle de maladie pour comprendre le rôle des protéases à sérine de la peau et identifier des cibles thérapeutiques – NETHERLINK

Le syndrome de Netherton (SN, OMIM 256500), est une maladie génétique cutanée rare, menaçant le pronostic vital, caractérisée par une érythrodermie desquamative, des anomalies spécifiques des cheveux et des manifestations allergiques sévères. Nous avons montré que le SN est due à la perte d’expression de SPINK5 (Serine Protease INhibitor of Kazal type, 5) codant pour la protéine LEKTI. L’étude des patients et des souris Spink5-/- que nous avons créées, montre que LEKTI joue un rôle essentiel dans l’homéostasie cutanée en régulant l’activité des protéases à sérine épidermiques, dont SCTE et SCCE. Objectifs- Identifier les protéases à sérine cibles de LEKTI et les conséquences de leur activation induite par l'absence de LEKTI. - Développer de nouveaux traitements applicables aux patients, fondés sur les mécanismes d'action identifiés. Réalisation1 - Création et étude phénotypique de nouveaux modèles murins La création de souris Spink5-/- conditionnelles inductibles permettra l’étude du phénotype des souris adultes invalidées pour Spink5. La contribution des protéases à sérine dans le phénotype de la maladie sera étudiée chez des souris double knock-out pour Spink5 et les gènes codant SCTE, SCCE, matriptase, PAR-2, et chez les souris transgéniques pour SCTE.2 - Etude des effets immunologiques de LEKTI Ces études seront menées chez les différents modèles murins in vivo et in vitro (système-modèles d'activation lymphocytaires). 3 - Identification des protéases Le rôle respectif des protéases cibles de LEKTI sera étudié chez les souris Spink5-/-et l'identité de la protéase de 28kDa sera déterminée par spectrométrie de masse.4 - Analyse moléculaire des effets de LEKTI sur ses cibles enzymatiquesLes propriétés inhibitrices de LEKTI et de ses fragments vis-à-vis de protéases à sérine candidates seront caractérisées in vitro.5 - Développement d'inhibiteurs enzymatiques compensant l'absence de LEKTIDes inhibiteurs enzymatiques des cibles identifiées de LEKTI seront sélectionnés par criblage à haut débit et leur efficacité sera évaluée dans les modèles murins. Résultats attendusCe projet permettra de comprendre les cascades biologiques cutanées et extra-cutanées, régulées par LEKTI, jouant un rôle important dans les manifestations du SN : desquamation prématurée, cornification anormale, hyperprolifération épidermique et manifestations allergiques. La caractérisation des protéases à sérine cibles de LEKTI, de leurs substrats et des conséquences de leur hyperactivité permettra de proposer des cibles thérapeutiques visant à contrecarrer l’absence d’expression de LEKTI. Le développement d'inhibiteurs spécifiques de ces protéases aura un fort potentiel d’application thérapeutique chez l’homme. La méthodologie fera appel à des structures hautement spécialisées, locales et nationales : la Clinique de la souris à Strasbourg, les plateformes phénotypage et protéomique GenoToul de la Génopole® et le Centre de Recherche en Pharmacologie - Santé (Unité Mixte CNRS – Pierre Fabre) à Toulouse.