Construction de nano-ligands pour bloquer l'entrée du SARS-CoV-2 – SARS2BlockEntry

Le SARS-CoV-2 a récemment émergé comme pathogène humain dans la province chinoise du Hubei, provoquant de graves maladies respiratoires et une pneumonie. Selon l'Organisation mondiale de la santé (OMS) le 17 mars 2020, il y a eu plus de 180 000 cas dans le monde, entraînant au moins 7 500 décès. Le développement d'un vaccin prendra au moins un / deux an (s) et la production d'un nombre suffisant de doses vaccinales pour protéger la population mondiale représentera un grand défi industriel. Il est donc urgent de mettre au point des antiviraux ciblant le SRAS-CoV-2 et les virus apparentés. L'objectif du projet est de produire des nanoligands (nanobody/VHH ainsi que des protéines artificielles hautement stables appelées aREP) ciblant le spicule viral S, capables de neutraliser le SRAS-CoV-2 in vitro et de protéger contre une infection dans un modèle d'infection animale. Dans ce but, nous ciblerons spécifiquement son domaine de liaison au récepteur (RBD) qui est connu pour induire des anticorps neutralisants à titre élevé pour d'autres coronavirus et se conformer indépendamment des autres domaines du spicule S. Des VHH neutralisants seront générés après immunisation d’alpagas avec le RBD du SARS-CoV-2 et des aREP neutralisants seront isolés à partir de plusieurs bibliothèques indépendantes. Ensuite, les propriétés biologiques des VHH et des aREP seront caractérisées (activité de neutralisation, affinité de liaison au spicule S (hautement glycosylé), thermo-stabilité, résistance à la trypsine et aux autres protéases présentes dans le poumon) et optimisées en séquence (humanisation de la séquence VHH , construction de VHH-Fc et aREP-Fc pour les fonctionnaliser pour le système immunitaire,…). Plusieurs de ces molécules seront sélectionnés pour analyser leur efficacité prophylactique et thérapeutique (administrées par la voie intranasale et/ou parentérale) dans un modèle d'infection de souris transgéniques. Ainsi, nous pensons que l’obtention de ces ligands ciblant le RBS du spicule permette l'obtention d'antiviraux ou servir de base à l’identification de nouveaux antiviraux capables d'inhiber ou de bloquer la multiplication du SRAS-CoV2 dans le poumon.