Thrombopénies acquises chroniques de signification indeterminée: physiopathologie et biomarqueur – ICTUS

Les thrombopénies chroniques isolées (TCI) sont des maladies fréquentes; la plupart d’entre elles sont liées à une destruction auto-immune des plaquettes et de leurs précurseurs médullaires, les mégacaryocytes (MK) et sont appelées Purpura Thrombopéniques Immunologiques (PTI). Cependant le PTI est un diagnostic d’exclusion faute de critères diagnostiques indiscutables, si bien que certaines TCI sont étiquetées PTI alors qu’elles ne sont pas d’origine immunologique. Nous avons montré que certaines d’entre elles étaient en fait des maladies hématologiques, dues à un défaut isolé de formation de proplaquettes par le MK, l’étape qui précède la libération des plaquettes. Pour cette raison, nous avons appelé ces TCI, Thrombopénies acquises chroniques de signification indéterminée (ICTUS en anglais). Comme nous avions montré antérieurement chez la souris que la protéine Bcl-xl, membre anti-apoptotique de la famille Bcl2, était indispensable à la formation des proplaquettes et la survie des plaquettes, nous avons émis l’hypothèse que les ICTUS pourraient être liés à une diminution de l’expression de Bcl-xL. Nous avons confirmé cette hypothèse en montrant une expression diminuée de Bcl-xL plaquettaire chez quelques patients aussi bien au niveau du transcrit que de la protéine. En plus nous avons montré que cette pathologie était associée à une inactivation non aléatoire du chromosome X, suggérant très fortement une hématopoïèse clonale. Ceci nous laisse penser que les ICTUS sont une forme d’hématopoïèse clonale de signification indéterminée (CHIP) associée à une thrombopénie qui serait la conséquence d’une diminution de Bcl-xL. Le but de ce projet est de mieux identifier cette nouvelle entité et d’en faciliter le diagnostic en développant un nouveau biomarqueur tel que l’expression plaquettaire de Bcl-xL. Cette approche permettra d’améliorer le diagnostic de TCI et les indications thérapeutiques. Le projet est divisé en 4 grandes taches médico-scientifiques. La première est consacrée à démontrer que cette hématopoïèse clonale est la conséquence de mutations acquises dans le système hématopoïétique. Pour cela nos utiliserons un abord pangénomique basé sur le séquençage de nouvelle génération (SNG), des CGH arrays et de l’ARN-Seq. Nous pensons identifier des mutations récurrentes qui permettront de définir le profil génomique des ICTUS. La seconde est dédiée à l’étude du rôle précis de Bcl-xL dans la mégacaryopoïèse humaine sachant que son rôle a été jusqu’alors uniquement caractérisé chez la souris. La troisième tâche a pour objectif d’identifier le mécanisme responsable du défaut d’expression de Bcl-xL chez les patients ICTUS, en essayant de faire un lien direct avec le profil mutationnel et les voies de signalisation dérégulées. Dans la dernière tâche, nous évaluerons si la mesure de la quantité de Bcl-xL s’avère être un bon biomarqueur des ICTUS et nous développerons de nouveaux anticorps dirigés spécifiquement contre Bcl-xL afin de les utiliser en cytométrie de flux et de détecter le niveau de Bcl-xL plaquettaire. En outre l’approche génomique devrait nous permettre de réaliser un SNG ciblé qui facilitera le diagnostic des TCI.
Ce projet est rendu réalisable par le fait que 3 partenaires (deux scientifiques et une équipe clinique) vont collaborer étroitement pour la sélection des patients et la réalisation des expériences. Les 2 partenaires scientifiques ont une expertise reconnue dans la biologie cellulaire et moléculaire de la mégacaryopoïèse normale et pathologique. Le coordinateur Mme Chloé James a réalisé tout le travail préliminaire et a identifié cette nouvelle entité. Les partenaires cliniques ont une réputation reconnue internationalement sur le diagnostic des TCI et plus particulièrement des PTI et font partie du centre de référence des PTI.
A la fin du projet, nous espérons avoir grandement amélioré le diagnostic des TCI en ayant défini de nouveaux critères diagnostiques et la physiopathologie des ICTUS.