"L'interrupteur de secours": Assurer la sureté de produits de thérapie cellulaire grace à l' ablation sélective du greffon par le gène suicide TK – TK-safe

La thérapie cellulaire est une approche thérapeutique actuellement en cours d¿évaluation dans un nombre de pathologies sans cesse croissant (maladies neurodégénératives, infarctus, cancer, pathologies musculaires... Cette approche repose sur le remplacement de cellules non fonctionnelles par des cellules exogènes pertinentes. Toutefois, quelque soit le type de thérapie cellulaire envisagée, il existe un risque constant que les cellules injectées exercent sur le patient greffé, des effets secondaires graves pouvant mettre en jeu son pronostic vital. Il n¿existe pas à ce jour de procédure permettant l¿élimination in vivo de ces cellules en cas d¿effet secondaires majeurs. Ce problème de sécurité est à ce jour l¿lobstacle principal au développement de la thérapie cellulaire et représente potentiellement à ce titre la possibilité d¿un accès à un marché considérable pour toute entreprise de biotechnologie engagée dans l¿offre d¿une solution thérapeutique à ce probleme. Ceci est l¿objectif principal de ce programme de recherche.
Le système proposé repose sur une ingénierie génétique avant leur injection permettant l¿expression d¿un gène suicide dans chaque cellule thérapeutique et la possibilité de les éliminer « à volonté » in vivo. LTKfarma, le porteur possède des droits d¿exploitation exclusifs en partenariat avec l¿Université Paris 6 pour 31 brevets sur l¿Europe les Etats unis et le Japon. Son ambition est devenir un leader mondial dans la sécurisation de la thérapie cellulaire//Il existe un risque constant à toute thérapie cellulaire que les cellules injectées exercent sur le patient greffé, des effets secondaires graves pouvant mettre en jeu son pronostic vital. Ce problème de sécurité est à ce jour le facteur limitant principal au développement de la thérapie cellulaire et représente potentiellement à ce titre la possibilité d¿un accès à un marché considérable pour toute entreprise de biotechnologie engagée dans l¿offre d¿une solution thérapeutique à cet obstacle. La technologie principale de LTKfarma repose sur l¿utilisation d¿un gène suicide permettant la transformation d¿une prodrogue, le ganciclovir, en composé hautement toxique pour les cellules en division. Cette approche a été validée dans le champ de la greffe de cellules souches hématopoiétiques. Ce projet a pour objectif de démontrer qu¿une telle approche peut être étendue à toutes thérapies cellulaires y compris celles utilisant des cellules dérivées de cellules souches embryonnaires humaines. La validation de cette approche par LTKfarma et le développement d¿essais cliniques associant cette technologie devrait permettre à cette société de biotechnologie de devenir une entreprise « leader » et incontournable dans le champ de la thérapie cellulaire.//La force motrice de ce consortium est d¿associer l¿expertise d¿une société privée de biotechnologie spécialisée dans les questions de sécurisation de la thérapie cellulaire (LTKfarma), avec celle de trois partenaires académiques, chacun situé parmi les leaders mondiaux dans des domaines spécifiques de la thérapie cellulaire. Le partenaire 2 est un pionnier en France de la recherche sur la thérapie cellulaire utilisant les cellules ES dans les maladies neurodégénératives. Le partenaire 3 apporte une expertise complémentaire dans la thérapie cellulaire chez le singe, en particulier dans la maladie de Huntington. Le partenaire 4 a développé et testé des systèmes de gène suicides chez l¿animal et dans plusieurs essais cliniques conduits chez l¿homme dans le champ des tumeurs solides ou, actuellement dans celui de la greffe de cellules souches hématopoiétiques. Son expérience dans les gènes suicides complète l¿expertise de LTKfarma.//Le programme TK-safe se concentre sur la gestion de risques majeurs de la thérapie cellulaire qui concernent la prolifération non contrôlée et les effets secondaires délétères des cellules greffées. TK-safe est divisé en six étapes. Une première série d'expériences in vitro a pour but la validation de plusieurs options d¿un système de sûreté pour la thérapie cellulaire. Une deuxième séries d'expériences in vivo, a pour objet l'évaluation du potentiel pré-clinique du système de sûreté choisi. La première étape (WP1) du projet sanctionne la disponibilité des deux types de particules virales basées sur le gène TK (TK-GFP-Luciferase et le vecteur TK-Thy1 pré-clinique) requises pour le reste du projet. Les étapes suivantes (WP2) correspondent à la validation des propriétés de ces particules virales in vitro. L'objectif est de produire et de purifier des greffons TK+ et de valider leur sensibilité à la drogue cytotoxique sélective, le GCV. Des vecteurs supplémentaires pourront être développés si les deux premiers ne fonctionnent pas comme prévu pendant les essais in vitro. Le WP3 détaille la validation des greffes TK+ dans des modèle in vivo appropriés de rongeurs : Les souris NOG pour les greffons composés de cellules Treg et les rat nudes Huntington pour les greffons issus de cellules souches embryonnaires humaines. Contrairement aux expériences menées in vitro, les tests réalisés in vivo chez le rongeur permettent d¿établir la dose et la période de traitement au GCV la plus efficace pour réduire au minimum la sur-prolifération ou les effets délétères potentiels des cellules greffées tout en maximisant leurs capacités thérapeutiques. Ces résultats seront utilisés dans des expériences pré-cliniques subséquentes exécutées exclusivement avec le vecteur pré-clinique (TK-Thy1). Dans le cas de greffe de Treg les essais in vivo pré-cliniques seront conduits chez des souris NOG mais après une production à grande échelle afin de valider la standardisation de la production massive de greffon composé de cellules Treg/TK+ en plus de la validation de la capacité du système suicide lui même. Dans le cas de greffons dérivés des cellules de souches embryonnaires, les essais pré-cliniques seront conduits dans un modèle de la maladie de Huntington chez le singe. Ce modèle est plus indiqué et adapté pour mesurer à la fois le potentiel thérapeutique d'une greffe et la probabilité de sur-prolifération des cellules neurales de primate dans un cerveau de primate. Les greffons dérivés de cellules ES seront produits pour ces essais pré-cliniques à partir de cellules ES de singe de sorte que les transplantations soient conduites en condition d¿allogreffe. Le but final du programme est de valider la capacité de notre système TK-safe à sécuriser deux types de greffon, utilisés dans des expériences précliniques de thérapie cellulaire, contre la sur-prolifération ou des comportements délétères du greffon sans compromettre l'action thérapeutique de cette approche.//LTKfarma détient les droits exclusifs d¿exploitation d¿un portefeuille de 31 brevets réunis dans six familles, suite à un contrat de licence établi avec l¿Université Pierre et Marie Curie (Paris VI) sur des droits couvrant l¿Europe, les Etats Unis et le Japon. La solide propriété industrielle de LTKfarma dans le champ de la sécurisation post-greffe de la thérapie cellulaire permettant l¿élimination de toutes cellules injectées potentiellement pathogènes est un atout majeur pour la commercialisation de son produit phare. L¿expertise et l¿expérience des partenaires seront déterminants pour démontrer la valeur de ces brevets et étendre sa propriété industrielle. Ainsi, LTKfarma devrait accédé au niveau mondial à l¿ensemble du marché de la thérapie cellulaire.