Evaluation de la tolérance à la protéine HIP/PAP dans le cadre d'un essai clinique de phase I chez des patients atteints d'hépatite aiguë. Prévention de la progression vers l'hépatite fulminante – HIP in Hepatitis

HIP/PAP, protéine sécrétée de 16kDa, est un puissant facteur de croissance hépatique. Ses propriétés in vitro et in vivo mitogéniques et anti-apoptotiques font de cette molécule un candidat prometteur pour le traitement des hépatites aiguës sévères et fulminantes. La société de biotechnologie, ALFACT INNOVATION, et l'unité de recherche, INSERM U785, unissent leurs efforts pour la valorisation et le développement de HIP/PAP. Dans ce cadre, les partenaires proposent d¿évaluer la tolérance de HIP/PAP en réalisant un essai clinique de phase I chez des patients présentant une hépatite aiguë. Le projet se décompose en quatre objectifs complémentaires : 1. Constitution d¿une Master Cell Bank en système bactérien E. Coli et production de lots cliniques cGMP ; 2. Etudes de l¿activité biologique de HIP/PAP recombinant in vitro (hépatocytes primaires de différentes espèces) et in vivo (modèles animaux d¿hépatite) ; 3. Etudes de pharmacocinétique sur culture d¿hépatocytes primaires, de toxicologie et de pharmacologie de sécurité sur deux espèces rongeur et non rongeur ; 4. Tolérance de la protéine HIP/PAP évaluée par un essai clinique de phase I monocentrique (Centre Hépatobiliaire, Villejuif) incluant 20 patients avec hépatite aiguë. L¿effet toxique de cinq doses croissantes de HIP/PAP (dose 1 définie par les études toxicologiques) sera évalué dans des groupes de 4 patients. La durée du projet est de 36 mois. Le coordinateur du projet est ALFACT INNOVATION et le promoteur l¿INSERM.//Nous proposons la protéine HIP/PAP issue de la recherche académique comme traitement curatif des hépatites sévères et fulminantes. HIP/PAP constitue la seule molécule rassemblant des propriétés mitogéniques et anti-apoptotiques (comme l¿Hepatocyte Growth Factor), facteur de survie (elle est seule) et anti-oxydant (comme N-acétyl cystéine) dans les hépatocytes. A l¿heure actuelle, il n¿existe pas de traitement pharmacologique curatif des hépatites sévères et fulminantes disponibles sur le marché. Les développements actuels concernent l¿HGF et des dispositifs médicaux. Ces derniers, MARS (Molecular Adsorbent Recirculating System) et ELAD (Extracorporeal Liver Assist Device) en phase III et II, respectivement, stabilisent l¿état clinique des patients dans l¿attente d¿une transplantation hépatique. Une seule molécule concurrente, l¿HGF, est en cours d¿évaluation clinique (phase I/II) dans les indications d¿hépatite fulminante, de syndrome « Small-For-Size » et de cirrhose du foie. A la grande différence de HGF, HIP/PAP ne présente pas de potentiel tumorigène (foie normal chez des souris transgéniques Albumine-HIP âgées de 2 ans). La forte stimulation de la régénération hépatique est observée après simple administration intraveineuse de HIP/PAP par opposition à l¿HGF qui requiert un transfert de gène par un vecteur adénoviral. ALFACT INNOVATION et INSERM s¿associent pour la réalisation d¿un essai clinique de phase I chez des patients avec hépatite aiguë. //INSERM et ALFACT INNOVATION s¿associent pour la réalisation de ce projet RIB. Ces deux partenaires mettent en commun leurs expertises et savoir-faire respectifs depuis janvier 2006 dans le cadre d¿un appel à projet Emergence de l¿ANR. Cette première phase a été une pleine réussite en terme de production industrielle et de preuve de concept de la protéine HIP/PAP manufacturée. Cette première étape encourage fortement les partenaires à poursuivre la valorisation et le développement de HIP/PAP dans les indications d¿hépatite sévère et fulminante. Le projet met à profit les compétences de management et du tissu industriel apportées par ALFACT INNOVATION et les compétences scientifiques et cliniques apportées par INSERM U785/Centre Hépatobiliaire. Ce projet déployé sur 36 mois doit conduire à la genèse d¿une nouvelle thérapeutique pour les hépatites sévères et fulminantes, ainsi qu¿à la compréhension des mécanismes cellulaires et moléculaires associés aux fonctions hépatiques de HIP/PAP.//Le projet évaluera la tolérance de doses croissantes de protéine HIP/PAP chez des patients avec hépatite aiguë lors d¿un essai clinique de phase I. Cet essai est sous condition de trois étapes:
1. La constitution par ProteineXpert d¿une Master Cell Bank (MCB) dans un système bactérien est l¿étape cruciale pour le bon déroulement du projet. Suivront les lots pré-cliniques puis cliniques de HIP/PAP qui subiront des tests d¿activité biologique décrits dans le point 2. La qualité des lots cliniques sera contrôlée (stabilité, pureté, formulation et activité). Les jalons sont la définition de la MCB, et le contrôle qualité. Les risques sont un mauvais rendement bactérien lors du «scale up», l¿obtention d¿une protéine inactive avec pureté médiocre. Les solutions sont la transformation d¿une nouvelle souche bactérienne et l¿amélioration de la formulation. Durée 18 mois.
2. Les études évaluant les effets biologiques et le potentiel toxique de HIP/PAP manufacturée seront effectuées par U785 sur des hépatocytes primaires de diverses espèces (rat, souris, chien, singe, homme). Différents schémas thérapeutiques seront étudiés dans des modèles animaux d¿hépatite fulminante (intoxication APAP et Fas). Les études réglementaires seront faites dans l¿espèce rongeur et non-rongeur répondant le mieux à HIP/PAP humain, et suivant le meilleur schéma thérapeutique. HIP/PAP et NAC, molécule de référence dans l¿hépatite à APAP, sont des molécules anti-oxydantes empruntant des voies moléculaires distinctes. L¿improbable interférence négative entre elles liée à une administration simultanée sera évaluée in vitro. Les risques sont une absence d¿effet biologique sur les hépatocytes de l¿espèce non-rongeur, cet effet étant déjà validé chez le rongeur. Ce risque retarderait le début des études réglementaires. L¿identification une autre espèce non rongeur (par ex. porc) répondant à la HIP/PAP humaine est obligatoire. Durée 12 mois
3. Les études précliniques réglementaires évalueront la toxicité éventuelle de HIP/PAP humaine sur les espèces prédéfinis dans l¿objectif 2. Elles engendreront 4 livrables correspondant aux études pharmacocinétiques, toxicologiques, de pharmacologie de sécurité, biochimiques qui constitueront une part du dossier soumis au Comité de Protection des Personnes. Ces études seront réalisées par Biodynamics et C.I.T. Durée 9 mois.
4. La tolérance à HIP/PAP sera étudiée lors d¿un essai clinique de phase I monocentrique (Centre Hépatobiliaire) incluant 20 patients avec hépatite aiguë. 5 doses croissantes (dose 1 définie par les études réglementaires) seront évalués dans des groupes de 4 patients. L¿évaluation clinique et biologique des patients de l¿étude constitueront les livrables, et conditionneront le passage à la dose supérieure. Le risque sera le passage à l¿hépatite aiguë sévère, la survenue d¿autres effets toxiques. Les solutions sont l¿arrêt de l¿essai, l¿analyse causale de cette toxicité et la redéfinition de l¿essai clinique.
//L'unité INSERM U785 et l'université Paris René Descartes / Paris 5, ont déposé un brevet européen (n° 03291487.1) le 18 juin 2003 intitulé : ¿HIP/PAP polypeptide composition for use in liver regeneration and for the prevention of liver failure.¿ Ce brevet a ensuite été étendu à l'international (PCT N° PCT/EP 2004/00663.3) le 18 juin 2004 par l'INSERM et l'université Paris V René Descartes. En Novembre 2006, ALFACT INNOVATION a acquis de manière exclusive les droits concernant le brevet n° 03291487.1 et son extension internatinale PCT N° PCT/EP 2004/00663.3.